Атэмк отзывы: Отзывы — Автотранспортный и электромеханический колледж (Санкт-Петербург и Ленинградская область) Санкт-Петербург, ул. Салова, д. 63,

Содержание

АТТ, Академия транспортных технологий — Учёба.ру

Я б в нефтяники пошел!

Пройди тест, узнай свою будущую профессию и как её получить.

Химия и биотехнологии в РТУ МИРЭА

120 лет опыта подготовки

Международный колледж искусств и коммуникаций

МКИК — современный колледж

Английский язык

Совместно с экспертами Wall Street English мы решили рассказать об английском языке так, чтобы его захотелось выучить.

15 правил безопасного поведения в интернете

Простые, но важные правила безопасного поведения в Сети.

Олимпиады для школьников

Перечень, календарь, уровни, льготы.

Первый экономический

Рассказываем о том, чем живёт и как устроен РЭУ имени Г.В. Плеханова.

Билет в Голландию

Участвуй в конкурсе и выиграй поездку в Голландию на обучение в одной из летних школ Университета Радбауд.

Цифровые герои

Они создают интернет-сервисы, социальные сети, игры и приложения, которыми ежедневно пользуются миллионы людей во всём мире.

Работа будущего

Как новые технологии, научные открытия и инновации изменят ландшафт на рынке труда в ближайшие 20-30 лет

Профессии мечты

Совместно с центром онлайн-обучения Фоксфорд мы решили узнать у школьников, кем они мечтают стать и куда планируют поступать.

Экономическое образование

О том, что собой представляет современная экономика, и какие карьерные перспективы открываются перед будущими экономистами.

Гуманитарная сфера

Разговариваем с экспертами о важности гуманитарного образования и областях его применения на практике.

Молодые инженеры

Инженерные специальности становятся всё более востребованными и перспективными.

Табель о рангах

Что такое гражданская служба, кто такие госслужащие и какое образование является хорошим стартом для будущих чиновников.

Карьера в нефтехимии

Нефтехимия — это инновации, реальное производство продукции, которая есть в каждом доме.

ГБОУ СПО Автотранспортный и электромеханический колледж, г. Санкт - Петербург, (АТЭМК)

Вконтакте

Twitter

Facebook

Одноклассники

Google+

Общая информация:

Год основания: 1944
Принадлежность: Государственный
Лицензия: Действительна бессрочно
Аккредитация: Действительна до 21.06.2012
Наличие бюджетных мест: Есть
Формы обучения: Очная, Заочная
Наличие общежития: Есть
Отсрочка от армии: Есть

Сайт в интернете: http://www.atemk.edu.ru/
Контактный e-mail: [email protected]

Директор ГБОУ СПО Автотранспортный и электромеханический колледж:
Корабельников Сергей Кимович


Полезные статьи для абитуриентов и студентов

Аноним написал отзыв про Автошкола АТЭМК, 07-10-2016

Училась в автошколе при АТЭМК в 2016 году
Стоимость — 32 тыс.
4 месяца обучение: 2,5 месяца теория 2 раза в неделю, 2 занятия на тренажерах, через 1,5 месяца после начала обучения начинается практика: 10 занятий по 1,5 часа на площадке, 15 занятий по 1,5 часа в городе.
У меня противоречивые чувства…
Плюсы:
— площадка хорошая, большая, с разметкой, как в ГИБДД. Находится рядом с автошколой
— все обещанные часы по теории и практике были откатаны и прослушаны
— есть действительно хорошие инструктора по вождению
— не выклянчивались взятки
Минусы:
— не знаю всегда так или просто нам не повезло, но у нас абсолютно бездарно преподавалась теория. Мужчина немолодого возраста просто зачитывал книжку с ПДД вслух, мало что объясняя, показывал видео, половина из которых устарели и давал решать билеты, которые тоже потом не пригодились.

— руководство не побеспокоилось о том, чтобы предупредить учащихся о новых билетах и нововведениях, вступивших в силу с 1 сентября и тупо гребла «бабосы» за пересдачи бедных учеников, которые не знали, что так может быть, что учат одни билеты и элементы на площадке, а сдают другие. И их никто об этом даже не предупреждает.
— инструктора. Это отдельная тема. Из пяти, которые вели у нас, говорят только один оказался действительно хорошим. Еще один тот же, что вел теорию — вождение преподавал неплохо, но с тем же безразличием. Еще один постоянно орущий на всех и вся. Два оставшихся: один плохо объясняющий, но вполне веселый и второй думающий, что веселый, но зато объясняющий лучше. Как-то так.
Без фамилий, чтобы никого не обидеть, но думаю каждый узнает своего инструктора здесь, если что))
— Площадка и город распределены так, что сначала откатываются площадка и только потом город. Сделано для того, чтобы после города перед экзаменом ученики хотели повторить площадку и брали для этого допнакаты.
Так что вам решать, достойна ли эта автошкола того, чтобы идти именно туда…

адрес на карте, телефон, время работы, отзывы, рейтинги

Контактная информация

Адрес: Санкт-Петербург, Салова, 63 — 1 этаж; вход со двора (посмотреть на карте).

Телефон: +7 (812) 490-57-10

Часы и время работы

Закрыто сейчас — 16:54

ПонедельникВторникСредаЧетвергПятницаСубботаВоскресенье
10:00–16:0010:00–16:0010:00–16:0010:00–16:0010:00–16:00Закр.–Закр.–

Карта проезда

Перед тем, как собираетесь поехать в Автошкола, изучите местоположение учреждения на карте.

Загрузка карты...

Дополнительная информация

Сайт: www.atemk.edu.ru

https://spb.allfirms.co/org/avat/Социальные сети:

Виды деятельности

Учреждение специализируется на 1 типе деятельности.

Похожие предприятия

На основе типов деятельности Автошкола, мы подобрали максимально близкие, аналогичные организации:

Бонус, автошкола

Адреса:
— Ударников проспект, 31 — 1 этаж
— Союза Печатников, 30 — цокольный этаж

5.0 cредняя оценка на основе 1 отзыва

1 просмотр

Дилижанс, сеть автошкол

Адреса:
— 9-я линия В.О., 56 — цокольный этаж
— Красносельское шоссе, 54 к6 — 1 этаж
— Лётчика Пилютова, 11 к1 — 1 этаж
Ещё 4 адреса

5.0 cредняя оценка на основе 2 отзывов

1 просмотр

АРГО, автошкола

Адреса:
— Киришская, 4 — 1 этаж
— Уточкина, 3 к1 — 304 офис; 3 этаж
— Ярослава Гашека, 17а — 308 офис; 3 этаж
Ещё 3 адреса

5.0 cредняя оценка на основе 2 отзывов

1 просмотр

Знак, автошкола

Адреса:
— Мосина, 8 — 201, 309 офис; 2, 3 этаж
— Привокзальная площадь, 1а к1 — 27 секция; 2 этаж
— Испытателей проспект, 39 — С корпус; 7 офис; 2 этаж

3.0 cредняя оценка на основе 1 отзыва

1 просмотр

Зебра, сеть автошкол

Адреса:
— Науки проспект, 17 к6 — 1 этаж
— Есенина, 5Б — 31 офис; 2 этаж
— Королёва проспект, 59 к1 — 2 этаж

1 просмотр

Межрегиональный ЦППК, ФАУ

Адреса:
— Болотная, 1 — 1 этаж
— Полюстровский проспект, 41 к2 — 1 этаж

3.0 cредняя оценка на основе 2 отзывов

1 просмотр

Авторалли, ООО, автошкола

Адреса:
— Лесной проспект, 1а — 1 этаж
— Каменноостровский проспект, 42 — 415 офис; 4 этаж

3.4 cредняя оценка на основе 5 отзывов

Отзывы

Оставить отзыв

Посещаемость страницы предприятия

2 посещения страниц фирмы.

© 2018-2021 Каталог предприятий и справочник организаций. Онлайн справочник Санкт-Петербурга, Санкт-Петербург, Северо-Западный федеральный округ.

Пользовательское соглашение | Политика конфиденциальности | Контакты

адрес, телефон, сайт — БольшойСправочник.ру

СПб Гбоу Атэмк относится к разделу каталога «ПТУ в Санкт-Петербурге». Контактная информация: адрес, телефоны, сайт и режим работы представлены ниже. Если вы представитель организации, вы можете внести изменения по ссылке «сообщите об ошибке».

Контакты

Санкт-Петербург, ул. Салова, 63

🔥 +7 (812) 766-68-56, +7 (812) 766-34-88, +7 (812) 766-33-88, +7 (812) 766-32-80, +7 (812) 490-54-62, +7 (812) 766-24-52, +7 (812) 712-88-44 🔥  Нажмите на ссылку, чтобы получить информацию о владельце номера.

пн-пт 8:30–17:00

http://www.atemk.edu.ru

Колледжи, ПТУ, Техникумы, Училища

Поделитесь ссылкой на эту страницу в социальных сетях, чтобы сделать её популярнее:



Отзывы и комментарии

Напишите отзыв об организации «СПб Гбоу Атэмк». Он поможет другим клиентам из Санкт-Петербурга принять решение, а руководству организации узнать о реальном положении дел. Пишите только честные отзывы и от своего настоящего имени. Сообщить об ошибке в информации об организации можно выше, в Контактах.

Оставляя отзывы на сайте, вы соглашаетесь с тем, что несете за них персональную ответственность. Администрация сайта не несет ответственности за отзывы, оставленные пользователями.

АКАДЕМИЯ ТРАНСПОРТНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ Большая Пороховская 37

АКАДЕМИЯ ТРАНСПОРТНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ находится по адресу: Санкт-Петербург, улица Большая Пороховская , 37. Телефон для консультирования по услугам +7 (812) 224-37-97, +7 (812) 222-65-58, +7 (812) 224-16-95. Для получения подробной информации об услугах доступен официальный сайт http://atemk.ru

Улица: Большая Пороховская

Дом: 37

Остановка: проспект Металлистов (ул. Большая Пороховская)

Расположение:

Официальный сайт http://atemk.ru

Телефон для консультирования/записи: +7 (812) 224-37-97, +7 (812) 222-65-58, +7 (812) 224-16-95

Email: [email protected]

Время и режим работы
Понедельник
08:30 - 17:00
Вторник
08:30 - 17:00
Среда
08:30 - 17:00
Четверг
08:30 - 17:00
Пятница
08:30 - 17:00
Суббота
Воскресенье

Автотранспортный и электромеханический колледж атэмк бывш латт. Автотранспортный и электромеханический колледж. Сервис на транспорте

Колледж приглашает учащихся 9 го класса на подготовительные курсы 4 месяца по математике и русскому языку с подготовкой к сдаче ГИА.

Занятия проводят высококвалифицированные преподаватели колледжа. Обучение на курсах дает возможность значительно улучшить знания, успешно сдать экзамены и ГИА в школе по указанным предметам, тем самым повысить средний балл оценок в аттестате, который является основным фактором для поступления в колледж.

В процессе обучения со слушателями подготовительных курсов проводится профориентационная работа, которая помогает определиться с будущей профессией.

Во время обучения проходят встречи родителей и слушателей подготовительных курсов с администрацией, преподавателями колледжа. Слушатели знакомятся с правилами приема, условиями поступления и обучения в колледже.
Статистика поступления абитуриентов показывает, что большинство слушателей подготовительных курсов успешно поступают и обучаются в колледже по выбранной специальности.

АВТОШКОЛА АТЭМК

С 1979 года в нашем колледже работает Автошкола.Двери Автошколы открыты для всех желающих обучится вождению.

Автошкола проводит подготовку водителей автотранспортных средств следующих категорий:
"В" - легковые автомобили;
"С" - грузовые автомобили

Санкт-Петербургское государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение `Академия транспортных технологий` (ранее Автотранспортный и электромеханический колледж)

Специальности колледжа

▪ Слесарь по ремонту автомобилей, Водитель автомобиля категорий «В», «С», Оператор заправочных станций, очно, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет

▪ Бухгалтер, очно, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет
▪ Очно, на базе 11 классов

▪ Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет

▪ Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет
▪ Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет
▪ Техник, заочно, на базе 11 классов

▪ Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет
▪ Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет
▪ Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев

▪ Специалист по сервису на транспорте, очно, на базе 9 классов, бюджет: есть , платно: нет
▪ Специалист по сервису на транспорте, очно, на базе 11 классов, бюджет: есть , платно: нет
▪ Специалист по сервису на транспорте, заочно, на базе 11 классов, 1 год 10 месяцев

▪ Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет
▪ Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: нет

▪ Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: есть
▪ Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть , платно: есть
▪ Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: нет , платно: есть

Ближайшие колледжи

Медицинский техникум № 2 – одно из старейших учебных заведений по подготовке среднего медицинского персонала в России. Техникум является прямым потомком петербургской Общины сестер милосердия св. Георгия и стремится к возрождению и развитию лучших традиций российского сестринского дела.

В Электромеханическом техникуме железнодорожного транспорта им. А.С. Суханова готовит высококлассных специалистов среднего звена. Выпускник техникума – это специалист, которому гарантирована интересная, стабильная и хорошо оплачиваемая работа после окончания обучения. Каждый, кто принимает решение учиться в техникуме, может быть уверен, что сможет успешно применить полученные знания. Студент техникума – будущий работник крупнейшей акционерной компании «Российские железные дороги».

Санкт-Петербургское государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение `Колледж Петербургской моды` (СПб ГБ ПОУ КПМ) - динамично развивающееся образовательное учреждение, успешно реализующее образовательные программы среднего профессионального образования в соответствии с требованиями Федеральных государственных образовательных стандартов.Колледж располагает современной материально-технической базой, которая обеспечивает необходимые условия для осуществления учебной деятельности, развития творческих способностей обучающихся. Существует еще 2 учебные площадки: Учебная площадка № 2 (на Дунайском) - Санкт-Петербург, Дунайский пр. д. 49/126; Учебная площадка № 3 (на Удельной) - Санкт-Петербург, улица Манчестерская, дом 8, корпус 1,2 Лит. А,Б

В Автотранспортном и электромеханическом колледже преподают профессиональные преподаватели, имеющие ученые степени, профессиональные звания и высшую квалификационную категорию. В колледже постоянно совершенствуется и обновляется учебно-методическая и производственная база. Более 180 кабинетов и лабораторий, оснащенных современным оборудованием, вычислительный центр, библиотека с фондом более 100 тыс. книг, столовая, большой спортивный комплекс, который включает в себя 3 спортивных зала, тренажерный зал, работают лыжная, футбольная, баскетбольная и другие секции. При колледже расположен учебный гараж и общежитие для юношей.

Специальности колледжа

Автомеханик

  • Слесарь по ремонту автомобилей, Водитель автомобиля категорий «В», «С», Оператор заправочных станций, очно, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет

Автомобиле- и тракторостроение

Экономика и бухгалтерский учет

  • Бухгалтер, очно, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет
  • Очно, на базе 11 классов

Эксплуатация транспортного электрооборудования и автоматики

  • Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет

Монтаж, наладка и эксплуатация электрооборудования промышленных и гражданских зданий

  • Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет
  • Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет
  • Техник, заочно, на базе 11 классов

Организация перевозок и управление на транспорте

  • Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет
  • Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет
  • Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев

Сервис на транспорте

  • Специалист по сервису на транспорте, очно, на базе 9 классов, бюджет: есть, платно: нет
  • Специалист по сервису на транспорте, очно, на базе 11 классов, бюджет: есть, платно: нет
  • Специалист по сервису на транспорте, заочно, на базе 11 классов, 1 год 10 месяцев

Техническая эксплуатация и обслуживание электрического и электромеханического оборудования

  • Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет
  • Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: нет

Техническое обслуживание и ремонт автомобильного транспорта

  • Техник, очно, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: есть
  • Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: есть, платно: есть
  • Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: нет, платно: есть

Укажите слово, в котором на месте пропуска пишется буква Е

Задание 1 из 5

засушл..вый

влюбч..вый

отпрыг..вать

подразум..вать

Проверить Далее

Задание 2 из 5

РЕДАКТОРЫ программы

горячий ОЛАДИЙ

НАДЕЛ шапку

ПРИЙДЁТ вовремя

Проверить Далее

В одном из приведённых ниже выделенных слов допущена ошибка в образовании формы слова

Задание 3 из 5

ЗАЖЖЁМ свечу

в ДЕВЯНОСТА сёлах

ИСПЕКЁМ торт

ситцевых ПЛАТЬЕВ

Проверить Далее

Расставьте все знаки препинания: укажите цифру(-ы), на месте которой(-ых) в предложении должна(-ы) стоять запятая(-ые). В 1894 году в Москве (1) появился Литературно-театральный музей (2) основу)3) которого (4) составила коллекция по истории русского и западноевропейского театра А.А. Бахрушина.

Задание 4 из 5

2

1

3

4

Проверить Далее

Отредактируйте предложение: исправьте лексическую ошибку, исключив лишнее слово. Аркадий Александрович Пластов писал портреты преимущественно стариков, на лицах которых запечатлены следы пережитого, и детей – эти ростки надежды с приметами будущей жизни, а в пору наивысшего расцвета творчества часто обращался к созданию своего автопортрета

Задание 5 из 5

часто

преимущественно

наивысшего

своего

Проверить Завершить тест

Результаты

Правильных ответов: из 5
Начать тест заново

Отзывы

Для того, что бы оставить отзыв

Артур

2 Отлично

Хорошее учебное заведение. Выпускает специалистов в области транспорта. Техническое оснащение не самое современное, однако опережает большинство подобных учебных заведений. Работают квалифицированные специалисты, большинство студентов достаточно добросовестно относятся к учебе и не испытывают проблем с трудоустройством.

Данил

2 Отлично

Не сказать, что учиться здесь тяжело. Правило простое: не нужно уж совсем забрасывать учебу, и тогда все будет по плану, в норме. Завалы перед сессией всегда трудно разгрести, лучше их не допускать! Есть, конечно, и халявные предметы, есть и жутко требовательные преподаватели. Скажу так: учиться не будет сложно, если есть даже небольшое желание. Если препод видит, что ты стараешься, то всегда пойдет навстречу, поможет. Проверено.

schedule Режим работы:

Пн., Вт., Ср., Чт., Пт. c 10:00 до 18:00

Общая информация

Санкт-Петербургское государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение Автотранспортный и электромеханический колледж

Лицензия

№ 2413 действует Бессрочно с 30.11.2016

Аккредитация

Нет данных

О колледже

Автотранспортный и электромеханический колледж был основан в 1945 году под называнием Ленинградский автомобильно-дорожный техникум. В 1972 году учебное заведение разместилось в новом здании, специально построенном для него Министерством автомобильных дорог СССР. В 2005 году изменился статус учебного заведения, теперь оно стало называться Автотранспортный и электромеханический колледж. За более, чем 65 лет существования в стенах колледжа было подготовлено несколько десятков тысяч квалифицированных специалистов среднего звена. Сегодня колледж является современным учреждением среднего профессионального образования, который осуществляет свою деятельность на основании государственной лицензии, выданной бессрочно Комитетом образования Правительства Санкт-Петербурга.

Залогом качественной подготовки специалистов является современная материально-техническая база колледжа. В соответствии с современными федеральными образовательными стандартами в области СПО колледж располагает просторными лекционными аудиториями, кабинетами для индивидуальных занятий, учебными лабораториями и мастерскими, оборудованными современной техникой, компьютерными классами с возможностью выхода в сеть интернет, библиотекой, спортивным комплексом, тренажерным залом, актовым залом, столовыми. При колледже работает автошкола, в которой проводится подготовка водителей категорий B и C. По результатам обучения студенты получают академическую стипендию. Иностранным и иногородним студентам не предоставляется общежитие.

Преподавательский коллектив Автотранспортного и электромеханического колледжа состоит из высокопрофессиональных специалистов. Подготовку квалифицированных кадров ведут кандидаты наук, педагоги с высшей и первой квалификационной категорией, а также преподаватели, отмеченные почтенными знаками и званиями Министерства образования РФ и Комитета образования при Правительстве Санкт-Петербурга. Студенты много времени проводят в учебных лабораториях и мастерских, благодаря этому по окончанию обучения они становятся по-настоящему ценными специалистами. Кроме того, все студенты, обучающиеся в колледже, проходят производственную и учебную практику в ведущих профильных учреждениях города. По результатам прохождения производственной практики студентов АТЭМК могут пригласить на работу в эти организации.

В соответствии с современными образовательными стандартами в колледже проводится подготовка специалистов по следующим направлениям: «Экономика и бухгалтерский учет», «Автомеханик», «Техническая эксплуатация и обслуживание электрического и электромеханического оборудования», «Эксплуатация транспортного электрооборудования и автоматики», «Сервис на транспорте», «Организация перевозок и управление на транспорте», «Автомобиле – и тракторостроение», «Техническое обслуживание и ремонт автомобильного транспорта», «Монтаж, наладка и эксплуатация электрооборудования промышленных и гражданских зданий». К обучению на этих специальностях на очной форме приглашаются выпускники девятых классов и одиннадцатых учреждений общего среднего образования. Зачисление абитуриентов проводится на основании результатов ГИА и ЕГЭ.

АТЭМК Автомобильно-электромеханический техникум бывш. Лат. Автомобильно-электромеханический техникум. Транспортная служба

Колледж приглашает учеников 9-х классов на 4-х месячный подготовительный курс по математике и русскому языку с подготовкой к сдаче в Государственную Академию Художеств.

Занятия проводят высококвалифицированные преподаватели колледжа. Изучение курсов дает возможность значительно улучшить знания, успешно сдать экзамены и ГИА в школе по указанным предметам, тем самым повысив средний балл оценок в аттестате, что является основным фактором при поступлении в колледж.

В процессе обучения со студентами подготовительных курсов проводится профориентационная работа, которая помогает определиться с их будущей профессией.

Во время обучения родители и ученики подготовительных курсов встречаются с администрацией, преподавателями колледжа. Студенты знакомятся с правилами приема, условиями приема и обучения в колледже.
Статистика приема абитуриентов показывает, что большинство студентов подготовительных курсов успешно поступают и учатся в колледже по выбранной специальности.

АВТОШКОЛА АТЕМК

С 1979 года в нашем колледже действует Автошкола. Двери автошколы открыты для всех, кто хочет научиться водить машину.

Автошкола обучает водителей транспортных средств следующих категорий:
«Б» - легковые автомобили;
«С» - грузовые

Санкт-Петербургское государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение «Академия транспортных технологий» (бывшее Автомобильно-электромеханический техникум)

Колледж по специальностям

▪ Слесарь по ремонту автомобилей, Водитель легкового автомобиля категорий «В», «С», Оператор АЗС, дневная форма, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается : нет

▪ Бухгалтер, штатный, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
▪ Очный, на базе 11 классов

▪ Техник, штатный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет

▪ Техник, очный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
▪ Техник , дневная форма, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемая: нет
▪ Техник, заочно, на базе 11 классов

▪ Техник, дневная форма, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
▪ Техник, очный, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
▪ Техник, заочно, по основа 11 класса с, 2 года 10 месяцев

▪ Специалист по транспортным услугам, дневная форма, по 9 классам, бюджет: да, оплачивается: нет
▪ Специалист по транспортным услугам, дневная форма, по 11 классам, бюджет: да, оплачивается: нет
▪ Специалист по транспортному обслуживанию, заочно, на базе 11 классов, 1 год 10 месяцев

▪ Техник, очный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да , оплачивается: нет
▪ Техник, дневная форма, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: нет

▪ Техник, дневная форма, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: да
▪ Техник, очно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: да
▪ Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: нет, оплачивается: да

Ближайшие колледжи

Медицинский колледж им.2 - одно из старейших учебных заведений по подготовке медицинских сестер в России. Техникум является прямым потомком Санкт-Петербургской общины сестер милосердия святого Георгия Победоносца и стремится возрождать и развивать лучшие традиции русского медсестринского дела.

В электромеханическом техникуме железнодорожного транспорта. В КАЧЕСТВЕ. Суханова готовит высококлассных специалистов среднего звена. Выпускник техникума - это специалист, которому после окончания учебы гарантирована интересная, стабильная и хорошо оплачиваемая работа.Каждый, кто решит учиться в техникуме, может быть уверен, что сможет успешно применить полученные знания. Студент колледжа - будущий сотрудник крупнейшего акционерного общества «РЖД».

Санкт-Петербургское государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение «Колледж Петербургской моды» (СПб ГБ ПОУ КПМ) - динамично развивающееся образовательное учреждение, успешно реализующее образовательные программы среднего профессионального образования в соответствии с требованиями ФГОС.Колледж имеет современную материально-техническую базу, которая обеспечивает необходимые условия для осуществления учебной деятельности, развития творческих способностей студентов. Еще 2 полигона: Учебный полигон №2 (на Дунае) - Санкт-Петербург, Дунайский пр. 49/126; Тренировочный полигон № 3 (на Удельной) - г. Санкт-Петербург, ул. Манчестерская, д. 8, корп. 1.2 лит. А, В

В Автомобильно-электромеханическом колледже работают профессиональные преподаватели с учеными степенями, профессиональными званиями и высшей квалификационной категорией.В колледже постоянно совершенствуется и обновляется учебно-методическая и производственная база. Более 180 аудиторий и лабораторий, оснащенных современным оборудованием, вычислительный центр, библиотека с фондом более 100 тысяч книг, столовая, большой спортивный комплекс, включающий 3 спортзала, тренажерный зал, лыжный, футбольный, баскетбольный и др. другие разделы. В колледже есть учебный гараж и молодежное общежитие.

Специальности колледжа

Автомеханик

  • Слесарь по ремонту автомобилей, Водитель авто категорий «В», «С», Оператор АЗС, штатный, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: нет

Автомобилестроение и тракторостроение

Экономика и бухгалтерский учет

  • Бухгалтер, дневная форма, на базе 9 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: нет
  • Очная, на базе 11 классов

Эксплуатация транспортного электрооборудования и автоматики

  • Техник, штатный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет

Монтаж, наладка и эксплуатация электрооборудования промышленных и гражданских зданий

  • Техник, штатный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
  • Техник, дневная форма, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: нет
  • Техник, заочно, на базе 11 классов

Организация перевозок и управление транспортом

  • Техник, штатный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
  • Техник, дневная форма, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: нет
  • Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев

Транспортная служба

  • Специалист по транспортным услугам, очно, на базе 9 классов, бюджет: да, оплачивается: нет
  • Специалист транспортного обслуживания, штатная, на базе 11 классов, бюджет: да, оплачивается: нет
  • Специалист по транспортным услугам, заочно, на базе 11 классов, 1 год 10 месяцев

Ремонт и обслуживание электрического и электромеханического оборудования

  • Техник, штатный, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачиваемый: нет
  • Техник, дневная форма, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: нет

Техническое обслуживание и ремонт автомобильного транспорта

  • Техник, дневная форма, на базе 9 классов, 3 года 10 месяцев, бюджет: да, оплачивается: да
  • Техник, дневная форма, на базе 11 классов, 2 года 10 мес, бюджет: да, оплачивается: да
  • Техник, заочно, на базе 11 классов, 2 года 10 месяцев, бюджет: нет, оплачивается: да

Укажите слово, в котором на месте пропуска написана буква Е

Задание 1 из 5

сухой... из

любовь .. из

назад

означает ...

Проверить следующее

Задача 2 из 5

РЕДАКТОРЫ ПРОГРАММ

горячий оладий

Наденьте шапку

Приедет вовремя

Проверить дальше

Одно из выделенных ниже слов содержит ошибку в формировании словоформы

Задание 3 из 5

СВЕЧКА

в ДЕВЯТИ деревнях

ВЫПЕЧКА ТОРТА

ПЛАТЬЕ ДЛЯ ПЕЧАТИ

Проверить дальше

Расставить все знаки препинания: указать число (а), на месте которого (а) в предложении должна (а) стоять запятая (и).В 1894 г. в Москве (1) появился Литературно-театральный музей (2) основа) 3) из которых (4) - сборник по истории русского и западноевропейского театра А.А. Бахрушин.

Задача 4 из 5

2

1

3

4

Проверить следующий

Отредактируйте предложение: исправьте лексическую ошибку, исключив лишнее слово. Аркадий Александрович Пластов писал портреты в основном стариков, на лицах которых запечатлены следы переживаний, а дети - эти ростки надежды со знаками будущей жизни, а в период наивысшего расцвета творчества он часто обращался к созданию своих собственный автопортрет

Задание 5 из 5

часто

преимущественно

высший

his

Check End test

результаты

Правильных ответов: из 5
Начать тест снова

Отзывы

Оставить отзыв

Артур

2 Отлично

Хорошее учебное заведение.Выпускник специалистов по транспорту. Техническое оснащение не самое современное, но оно опережает большинство подобных учебных заведений. Работают квалифицированные специалисты, большинство студентов достаточно сознательно относятся к учебе и не испытывают проблем с трудоустройством.

Данил

2 Отлично

Нельзя сказать, что учиться здесь тяжело. Правило простое: совсем не нужно отказываться от учебы, и тогда все будет по плану, нормально.Завалы перед сеансом всегда сложно убрать, их лучше не допускать! Есть, конечно, бесплатные предметы, и есть ужасно требовательные учителя. Скажу так: учиться не составит труда, если есть хоть малейшее желание. Если учитель видит, что вы пытаетесь, он всегда пойдет навстречу, поможет. Проверено.

график Время работы:

пн, вт, ср, чт, пт с 10:00 до 18:00

общая информация

ул.Санкт-Петербургское государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение Автотранспортно-электромеханический колледж

Лицензия

№ 2413 Действует бессрочно с 30.11.2016

Аккредитация

Нет данных

О колледже

Автомобильно-электромеханический техникум основан в 1945 году как Ленинградский автомобильно-дорожный техникум. В 1972 году учебное заведение разместилось в новом здании, специально построенном для него Министерством автомобильных дорог СССР.В 2005 году статус учебного заведения изменился, теперь оно стало называться Автомобильно-электромеханический техникум. За более чем 65 лет существования в стенах колледжа подготовлено несколько десятков тысяч квалифицированных специалистов среднего звена. Сегодня колледж - это современное учреждение среднего профессионального образования, которое действует на основании государственной лицензии, выданной бессрочно Комитетом по образованию Правительства Санкт-Петербурга.

Залогом качественной подготовки специалистов является современная материально-техническая база колледжа.В соответствии с современными федеральными образовательными стандартами в области открытого образования в колледже имеются просторные лекционные залы, кабинеты для индивидуальных занятий, учебные лаборатории и мастерские, оснащенные современной техникой, компьютерные классы с выходом в Интернет, библиотека, компьютерные классы. спортивный комплекс, тренажерный зал, актовый зал, столовые. При колледже действует автошкола, где готовят водителей категорий В и С. По результатам обучения студенты получают академическую стипендию.Иностранным и иногородним студентам общежитие не предоставляется.

Преподавательский состав автомобильно-электромеханического колледжа состоит из высокопрофессиональных специалистов. Подготовку квалифицированных кадров проводят кандидаты наук, учителя высшей и первой квалификационных категорий, а также учителя, отмеченные почетными знаками и званиями Министерства образования Российской Федерации и Комитета по образованию при Правительстве Санкт-Петербурга. Петербург.Студенты много времени проводят в учебных лабораториях и мастерских, благодаря чему по окончании учебы становятся по-настоящему ценными специалистами. Кроме того, все студенты колледжа проходят производственную и учебную практику в ведущих профильных учреждениях города. По результатам прохождения производственной практики студенты АТЕМК могут быть приглашены для работы в этих организациях.

В соответствии с современными образовательными стандартами колледж готовит специалистов по направлениям: «Экономика и бухгалтерский учет», «Автомеханик», «Техническая эксплуатация и обслуживание электрического и электромеханического оборудования», «Эксплуатация транспортного электрооборудования и автоматика», «Сервис на транспорте», «Организация перевозок и управление транспортом», «Автомашиностроение и тракторостроение», «Техническое обслуживание и ремонт автомобильного транспорта», «Монтаж, наладка и эксплуатация электрооборудования промышленных и гражданских зданий».На очную форму обучения по этим специальностям приглашаются выпускники девятых классов и одиннадцатых общеобразовательных учебных заведений. Набор поступающих осуществляется на основании результатов Государственного экзамена и экзамена.

Herald and Review из Декейтера, Иллинойс, 18 августа 1996 г. · Стр. 69

1X1 мг итраконазола в капсулах) ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: Коадфибнстраты терфиндина с итнауолом и контентомдиолфом. Seriots asditwfnto.ai.m hmoomncd в ptixnts, которым нравится rtraoauzotg apnoDBUUndr с (afcudiM.Это происходит из-за заниженных значений trrfrnadii cmcentntions, вызванных tirxoauok- см. CONTRAINEHCA'nOS, WA & amp; NTNGS и раздел «МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ». Awothg cni cole противогрибковое, иетаумовое. На основании результатов исследования, проведенного на основе анализа и умеренного тестирования, коалиции и диемиального теста, сочетания кетимицинцита и изоцитузола, а также кетимицитузинузола и кетимицитузола цизаприд с итраконазолом не показан.Серьезные сердечно-сосудистые осложнения, включая смерть, желудочковую тахикардию и торсад-де-понт, были отмечены у родителей, у которых есть потенциал кореонутантной терапии с помощью даприда. См. КОНТРАКТЫ, WATWSTaPRfbTK5stcbo. ПОКАЗАНИЯ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ STORANCW feacoazote eapsoW m trpmincccmppinwfd и lannmipnccaTipiCTnisfd pabetts: L BUmuoikubs, puhnorury и extrzpabncfurT; lAspemlkmp lory tDastpbotEron B, если 40pychaijymidoetodaiiyatjlB (tiaca tiiguiDfri of the teeaai widi или без fiuggtufl ry, b prtentt, кто добавлял или поддерживал WARNING BINDICATKFS и PRINDICATKFS e или dsarrdansc) SPORANOX с aoi tnazotaoi или с устным ww "na является совместным.SeerTOCALTLONSstctoi) SPOKANCK не следует использовать для лечения галстуков. Нет никаких сведений о перекрестном соединении между ituconajole и другими azofeaBtifangalaga & amp; Cjabca sensknnrv с другими изолами. ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ i. В США было зарегистрировано три случая гепатита, вызванного вирусом kSicsyrrntx, а также более 200 pMietSKiRASOXtiKotudkasiOK poo on & amp; ide me U dewJoped fnhnnant bepm6aa5xlawaS0X.Этот псбент был на двух свадьбах. Причинная причина для SPORANOX - это не заболевание, вызывающее заболевание сердца. Разделы «МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ») Comocaiart acta cisipridc piasna coDOstfraticK, pnta Яичниковые арринритмии и торсады pcittiabittopoltriH, основная система, ответственная за метаболизм цизаприда (cytcchrccne P450 IM), поэтому ожидается, что концентрация препарата в плазме крови вызывает концентрацию бактерий SPR в плазме; axttmndjcated.Gee BOX ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ, ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ и МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ) МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ GnCTt Показатели энзринных тестов в печени следует контролировать в pafagpti с выявлением аномалий Wnt-fanrv bon. У всех пациентов, принимающих лечение QJrtiraMiB, следует периодически контролировать показатели печеночных эннэмических тестов, чтобы больше симптомов предполагало наличие дисфункции печени. SPORAMDKiitracouzokcapKilesls L'nderfaaledcL-diboniDaconazote кислотность. Ахсорфон итраконазола может быть уменьшен с помощью eeniomiuiit adcanstradon aataods или juppnsns секреции желудочной кислоты.Шид остановил то, что применение препарата сотрясения помогло уменьшить абсорбцию итраконазола у больных СПИДом, если они были восстановлены или полностью устранены. Это увеличение, связанное с эффектом приема пищи на основе foB, неизвестно. 6ftnTirpCrfcPatei Пациенты должны сообщать о любых сэнсах и синрптомах, которые могут указывать на дисфункцию, чтобы можно было провести лабораторное тестирование. Такие признаки и симптомы могут быть связаны с итраконазолом и основным метаболизмом hyt4fmvii..iff4f mhftilrjn строки erarme i.rudiiiK P450 3A4. Обработка 5rX3RANOX и капля лекарственного препарата с помощью критохрома P456 3A4 enzrmg mtm guy rwuk m mrmxH сливы, rm-беконы, содержащиеся в организме, или пробная терапия удавов, вызванная другими способами, увеличенная концентрация препарата в плазме крови привела к увеличению концентрации плазмы крови. m & amp; imf t4 hfa-tfjpaimng i-wrfaf riwtrhMiNmm pd one dfith ffff BOX WASMNC, CONTAINaCAIXS. ml WAIMNGS xami Anothfr on uaif ficijl krtocoruajr, iafabM thp mrtjtoiisn at utemjeie.rrsijlaij; в п NKD pfasm atomta из КМН объявление в Тарн mtukdix dtawkrUaram wtuji луч рп "s QT ч Оя sagst d taaxaak, когда anpiRdiolnxnaxfc хань много urmimi rifptt на THG bkjtriiafarancn sratem mccfB & Amp; т та теге axttbriaa d utitiiirk Bae & амп;. auitdaiaiiMrMiNrol taooaMolgd kmnttzote oMdiiiijiflljiliuB из Сегмент BOX W ARNINtCONIliAINI) ICATl (fi, nd WABNINCS Kcaom) Hamm phmMaAiBgtia dm adialg, который позволяет использовать эту информацию.ta am ditt mmst Hat imauzolt ho iiyiktiiihMlhebicniriDnaliisittm в основном rgrooaabig для tiK метаболизма дсаприда; Перед этим одновременно с приемом SPORANOX и cBapride, если он был назначен. Sec BOX ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. irtWAJtMNCSlgdionL) Cmdmzitnaoct of? y08ANOX устный rradazuiim или tmioiara имеет tgstgd m eigvitgd pUsma ccoamraoooa двух более поздних rjntp. Tloj ray powitulg ari rrol rn-mw arj damg grftm Thtx tpm Мне не следует, чтобы bg пометил putrms ntattd с помощью SPORAN'OX. Если мидаулам является ailiiiliilluedpaiBiaraauy.sraKialpiriaiiliwisrarffl fcCTMlNIXT) CnijlU Coidrrmnarratirjo SPORANOX и cydcatporine. tacrobmn или diyain имеет M id irgreawd poan tiiiniHMOs thg btlcr tfoggdrocs. Cydosporine, wufwwi и digoxn oaKEntitoorai shrjdd r tiuored at dc iabani of SK) r at ust ting onaj pnouca aosasnarjtinrniitiy. Потом? hm bggn nrg отчет о rhaUajuiniyia igvegrirtg rgnal tnwtpiant pabents mriyirit tag ujanfanariiw SPORANOX. lyduajumg. aod tag rfMGCoA Igdactatt inhfatoo kwatara или imrraitadn. RhaliduinrutyMi имеет ogen ooagrrgd в pabertB rgopYing HMG-CoA rgdoctaae limyinhainiiyihHSBit WhB SPORANOX wan oadontad with rHirW.rikra.arH, iiMnaialawofwaoMBoigwagjgputHXTherAysmE связь с Sjanmioig, который использует NTSG DM, однозначно используется, чтобы получить доступ к STORANOX tngrmny. ABOTrh № 1B harg bgm oxiifciM onnraM adrrmrm of It has bggn rrportrd that SPORANOX enhanoH tag anamatulact crJra of axarjnivlig dnir Tarrgiort tronbin Bmg ihould bg arrtuSy mertferai m ptbguajtaso. Ptastna coocgrttrauufts of azolg anbitmga atenot arg reducgd whgn grrgg coocirrgTrthf wrth jsorua bncorua pbsna cooon iliinianrt an timliiiiiiilnTrl Sever hvpojttytrasa aid hai bpra rrportncomjadents australiaSPORANOX и устный lrypoglycggtK agrjfa являются rtwrrniriBaueJ. TaminB и detrgatgd bgarBi hare bggn iqulgd в pabgnts couixiuUitly lajBriiu SfvK.ANOX и ymridine. Отек был зарегистрирован у пациентов liaatiniunriy itonriog SPORANOX и diiTydropyndiar alcnun channel btxierj. Корректировка дозировки Appropnalg может произойти. Resotojrron l исследование, в котором восемь человек, инфицированных вирусом гепатита C, были побиты адреналином. 8 1 0,4. мг кг в день, показали, что фармакокоронка акнд рнраксинррантадржилусорарМ Цимийир.Atoafeejriprar grxjory pottrmal m itot, принимаемый перорально от B. trnpranrrutgiy 10a rite ra 25 мг кг / день (11x MRHO) имел слабую инертность sr snnras, возможно, имел пункт a rrarxifxno! ratdocorraxrmtocrniKitraooiiar f2Si MRf был выделен по сравнению с необработанной группой. Несмотря на то, что одним из самых известных в AMG является eirrenteryrrrroiTrrCTm ultra UraaiTazolgrjrorfacgdrorraitat и nuniirulian test systeras. biaiiazote не повлиял на 40 нгкг / день (5 MRHD), кроме тяжелого ощущения родительского Bndry, iadlidrH dend go raenl m nMraday (2toOHDI.hrmtcr. Terateroc Effgrrj. fterrorry Категория C rnacorazole была обнаружена как doag-refated innrwig m matptral traririly, wnl.wai.i. Hy jwH tMnjry in rati at rlwagp tevrh nf ararorunately -lo0 BxWtaf & amp; & amp; i (MS) u4anaiilri & amp; dmannt & amp; W ragWday flb Mlli & amp; l in r oonSBked of rrarpflalorrha andor aucrrarkwa. Во время беременности Ифтельргаф нет никаких симптомов. SPORANOX не должен заменять двадцатиминутную карту памяти и регистрацию на сервере TLX SRSR ShooMrtecofJiiaritlnraae.Nurwtj Mcltm kraaiuirie добавлено в hmrran trnfc rhr, поэтому SPORANOX не должен быть arliiiiiiwaseri tDrMisfggwoenen. Эффективность MrfrTri и безопасность pfiatmaoaVrnenc daa были обработаны wmh 100 мг uraconaroie для систем foagal eugcaors и ao srrxvs mrimrrl adverteertects hwe были teputteU. b rrin trno Ibdas um asMrrkgdayCAMIWDl.TVrndoariddem tbtring обряда и исправления tttgkgday Out huflDloverarteyear или 160 ngkgday QOx MRHD) har sutraoojlra, irrafnnarrarrahtsrahtsrahtsrrria8 в уроков педиатрии.rWehrlJfarrfrrrjrtrf aCMtplaonciiliaaasarotea Результаты представляют собой исследование, в котором восемь человек, прошедших лечение с помощью rjdotudrng, лечились. она О.А. rngkgday, показал, что phannaoatdneticl из btaavtadute не были & амп; КТИД durina»orarmrantadinirjrrationofSP ПОБОЧНЫЕ Hu5 хоровая Irak piorBrnaite tepcatral amoiig nxae, чем 2500 РАМ и умер durmg Споранокс (jcramnaroecarsuteladrrmron trptetrasiicalionLte ONYOfOkTrtBSB: Adverx ewjts м ajlowmg вкладка llrooencell) MvSvtleuiAdVerteEtent UI13 rjrvatgd Liper Etuyines f2anorflalratieri n Gasrrcanterirairascttto n Rash W Hvrgtenaon 2 Orthoarrpraeracai H hca) gnce () Boil SiiW Неблагоприятная Erea (th3) Головная боль H Malaise H Mvakia 1 Vespiars II Veraea ItSmKrTeRJON данные в таблице Rash W Hvrgtenaon 2. imnuiiwiMinaiii.wilfgwffr1jil iwirfjrrrTCTnr laatiterUarjotiiCXilteK события. Средняя продолжительность терапии перед дакоримуаркрией составляла 4 дня, в течение 2-7 дней. Edema 15 ftttgue U fm 25 Malaite u SkraaniAppeaoaees Rath tv fturiras 25 Центральная и правая боковая нервная система HeadLtcne 3J ttzanas 17 Bodv Sjnkm Advsse Event (modeacem) hcidenceW hvchiattnc Dbordecieciecieciecée de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de la de des des des des jоров времена года качества воздуха 13 лет.я. 3J HywAalena 10 lfTivaiySyiaWasoRkn AflximiTiina U Печень и Susy системы Dtndezs HepattfunctaOBiVtratiM 17 Репродуктивное KsanaaMafe onpobnoe 12 Kjtati tntni ToMV ч inqtatMaSi н tBtnmcoBp gdpuiii.iiiigagaiiiwiiiiaiiiiiii Неблагоприятные события inmrqugndy reparted м ао irudigs mcbded: aiosopahoet, eastnbi, oprgBon, Kiwrnnia. шум в ушах, менструальный цикл, раздражение надпочечников, боль в груди и мужская грудь. Эффективное управление с помощью SPOrWOX.atrric rgachora ineradfra; сыпь, pmri-BaurraamarmstaM bajR rirralel rVlaiietir eraaira.Артеаджх катра. ataodaran wrm srXlRAh и noiatedcaaesof raroca rave artt заплетены. ПЕРЕДОЗИЦИЯ. Преподобный апр! 1995, Отдельный 1W STOUaradraterMiai aiay вдали от мабоасни помилоцитов; террткр. ptasma oaicenrrabuns cipnerrvaatslaMialaobera JANSSEN g i Fresh Voice? ПРОДОЛЖЕНИЕ вы в безопасности? Дети вырезают дыру в заборе и прячут оружие в грязи.И они могут пойти в этот тайник и унести тебя. Когда я разговариваю с детьми, я всегда говорю им, чтобы они ходили в школу. Я говорю: «Либо школа, либо тюрьма». Некоторые из них не понимают: «Если ты пролишь на меня выпивку, чувак, я тебя взорву». Я говорю: «Либо мы живем в мире, либо« покойся с миром »». Все просто. Недавно у дома моей кузины устроили перестрелку, эта банда проехала мимо и застрелила ребенку лицо. Полиция поместила его в багажник машины, чтобы люди не смотрели на него. Коронер не приезжал три или четыре часа.Это просто заставляет вас чувствовать, что людям, которые руководят вами, все равно. Руба Муслех, 16 лет, из Иерихона (под палестинским самоуправлением): Я не понимаю, почему американец убивает другого американца и не заботится об этом. У вас такая же земля. Вы же нация. Зачем вы конфликтуете? Анил Сони, 19 лет, из Нортбрука, IIIj Да. Мы американцы, но все равно убиваем друг друга. Америка - великая страна, но мы все еще говорим о черных и белых, богатых и бедных, и мы используем эти различия как оправдание для насилия.Мы не смотрим на то, что у нас есть вместе. Но, видите ли, я могу взглянуть на вас и сказать, что израильтяне и палестинцы не видят, что они оба люди. Тарья Крехич, 20 лет, родилась в Боснии и Герцеговине, переехала в Загреб, Хорватия: Я не могу понять, что США так хорошо развиты и помогают другим странам, но позволяет себе двигаться в этом направлении. Это слишком смешно. Я думаю, вы должны задать себе вопрос, который задаете нам: «Когда вы будете готовы это остановить?» Рон: Когда правительство показывает таким сообществам, как мое, что они на нашей стороне.Если дети видят, что общество заботится. Линн Минтон: Как вам удалось все это преодолеть? Рон: Чем старше я становился, тем легче было умереть. В эмоциональном плане дело дошло до того, что каждый день, выходя из дома, я думал про себя: «Я могу не вернуться домой сегодня вечером». Я скажу вам, что меня вывело: видение. Видение того, что мне не нужно следить за своей спиной, я чувствую себя в безопасности без оружия. И видение успеха. Клуб мальчиков Омега нашел меня. Я учился в седьмом классе, еле ходил в школу. Но учитель английского языка увидел написанное мной и сказал: «Это потрясающе.«Она была соучредителем Omega Boys Club, и она сказала:« Почему бы тебе не прийти на встречу? »Сначала я возмущался, что она пытается поддразнить. Мне было стыдно за то, что я тусуюсь до 5 утра. в темных углах, продажа наркотиков. Стрельба, ограбления, мы все это делали. Я был заперт 23 раза. К счастью, у меня не перехватило дыхание. Но этот учитель оставался со мной каждый день: «Рон, иди в школу. Даже если ты просто придешь в мой класс ». Она заставила меня почувствовать себя кем-то, сказала мне, что я одаренный писатель.Ребенку, который пришел из той среды, из которой я пришел, трудно понять, когда люди пытаются связаться с вами, потому что это ново. Я не доверяла ей неделями, месяцами. Однажды в субботу вечером меня ограбили. И эти парни сказали мне, что если я скажу что-нибудь об этом, я умру. Я писал о том, что произошло, используя другие имена. Но этот учитель знал, что это я. Она сказала: «Рон, ты умрешь там, если ты не придешь в клуб и не получишь поддержку семьи». Она стала заменой моей матери, которая пристрастилась к кокаину.Моя цель в жизни сейчас - спасти жизни других детей. Я устал смотреть, как умирают дети. Никто не может быть в безопасности. Но если вы окружаете себя позитивными людьми, как в клубе для мальчиков, это для вас безопасная гавань. Но нужно быть готовым к переменам. Есть много людей, которые скажут вам: «Я собираюсь измениться. Я не собираюсь делать это вечно, но я буду делать это еще немного». Я видел, как люди зарабатывают 100000 долларов на продаже крэка. Дети становятся зависимыми от образа жизни. Они будут кидать вам много оправданий: «У меня есть счета.Я стремлюсь к своей семье, чувак. Я не могу разориться ». Это первое, что они говорят вам:« Я не могу разориться ». Я остановился, потому что ценил дыхание. Я не хотел оказаться в гробу в 18 лет. F- jt; 7- tii 123 .i;. ,, Y-.4vi i.Cu..4.; xtiU! vl -;.: '-' 1 J Write tynn Mnton, Box 5H) 3, Grand OntrtJ Station, Now York,: NV 10163-5103. Пожалуйста, укажите дневную телефонную трубку. Каждую 1 i прочитанную букву, но личные ответы, к сожалению, невозможны. - "- - - - - TnmW. HI 0IScaVa) СТРАНИЦА 12 18 АВГУСТА 1996 ЖУРНАЛ PARADE

растений | Бесплатный полнотекстовый | Использование морфогенных генов для улучшения восстановления и регенерации трансгенных растений

3.Стратегии улучшения трансформации с использованием морфогенных генов

Учитывая направленность этого обзора, легко понять, почему исследователи в области трансформации растений рассматривают гены, описанные выше, как потенциальные инструменты в процессе трансформации. Однако конститутивная и сильная экспрессия этих морфогенных генов часто вызывала нежелательные плейотропные эффекты, включая снижение фертильности. В примерах, обсуждаемых в этом разделе, преобладающими стратегиями были конститутивная экспрессия морфогенных генов (рис. 1A) или индуцибельная экспрессия в стабильно трансформированных растениях (рис. 1B).Для обеспечения истинной полезности требуется дополнительный этап: сочетание оптимизированной экспрессии используемых морфогенных генов растений с надежным методом ограничения экспрессии после того, как произошла трансформация / регенерация растений и истек срок их полезности. Такие методы обычно демонстрируют повышенную эффективность трансформации, усиленную регенерацию или и то, и другое таким образом, чтобы получить здоровые, плодородные растения T0. Следует также подчеркнуть, что для характеристики фенотипов с усилением функции, как во многих приведенных выше примерах, стабильную трансгенную зародышевую плазму получали с использованием обычных методов отбора (например, после трансформации цветочным окунанием у Arabidopsis).В результате эктопический фенотип был оценен в гомогенно трансгенных тканях растений, полученных из семян. Это контрастирует с экспрессией морфогенного гена в одной клетке, окруженной тканью дикого типа, как при попытке использовать морфогенный ген для восстановления трансгенных событий. В этой ситуации дифференциальная экспрессия морфогенного гена обеспечивает положительное преимущество роста или идентифицируемый фенотип (по сравнению с клетками дикого типа), который можно использовать для отбора. Так обстоит дело в примерах, описанных ниже (см. Таблицу 1, Стратегия C).Есть несколько сообщений, описывающих эктопическую сверхэкспрессию морфогенных генов; однако вредные плейотропные фенотипы наблюдались у растений, когда они экспрессировались конститутивно. Исследования о том, как контролировать время и уровень экспрессии этих генов посредством подавления или устранения, запаздывают. На сегодняшний день в литературе мы можем выделить четыре подхода к решению этой проблемы: (i) стимуляция морфогенного ответа роста посредством индуцируемой экспрессии морфогенного гена (рис. 1B) с последующим удалением индуцирующего лиганда для выключения экспрессии, (ii) иссечение морфогенного гена растения (рис. 1C), когда он больше не нужен, (iii) использование промотора растения, который отключается, когда он больше не нужен для обеспечения нормального роста и размножения трансгенных растений, и (iv) использование опосредованной Agrobacterium доставки в способ, который способствует временной экспрессии морфогенных генов (рис. 1D, E).Индуцибельная экспрессия предоставила надежный метод использования морфогенных генов для восстановления фертильных трансгенных растений. Сообщений о трансформации непокорных видов немного, поэтому первый представленный здесь случай использования индуцибельного морфогенного гена для улучшения трансформации и регенерации заслуживает особого внимания. Сорта перца (Capsicum annuum) обладают очень низкой эффективностью трансформации и регенеративной способностью. Heidmann et al. [50] трансформировали эксплантаты семядолей двух сортов сладкого перца конструкцией 35S :: BnBBM ~ GR и культивировали эксплантаты на средах с добавлением тидиазурона и DEX в течение 2 месяцев.Появившиеся побеги переносили на среду для элонгации без DEX на 4 недели, а затем на среду для предварительного укоренения на месяц. Эффективность трансформации с регулируемой экспрессией BBM составляла> 1% по сравнению с 0% с конструкцией 35S :: GUS (β-глюкуронидаза). Это важный шаг вперед в том, что исторически было очень устойчивой культурой. Кроме того, используя DEX-индуцибельную систему AtBBM ~ GR, Лутц и его коллеги [51] описали метод получения фертильных трансгенных растений Arabidopsis из листовых культур. В отсутствие ауксинов трансгенные листовые эксплантаты давали плодовитые побеги примерно за 4 недели в присутствии DEX, в то время как эксплантаты на среде без лиганда не давали побегов, а эксплантаты из растений дикого типа становились некротическими, независимо от того, был ли добавлен DEX. или не.Восстановленные побеги затем разрезали на более мелкие сегменты и регенерировали на среде, содержащей DEX, в течение 3 месяцев. Удаление побегов из среды, содержащей DEX, позволило восстановить всходы с нормальным цветением и формированием семян в течение 3 месяцев. Из собранных семян получали фертильное трансгенное потомство. Используя эстрадиол-индуцибельную систему [38], Wang et al. [52] идентифицировали гены АКТИВАЦИИ РОСТА РАСТЕНИЙ, такие как PGA37, которые приводили к переходу из вегетативного в эмбриогенный при сверхэкспрессии у Arabidopsis.Хотя нижестоящие мишени еще не охарактеризованы, было установлено, что PGA37 кодирует фактор транскрипции MYB118 на основании структурного сходства в ДНК-связывающем домене. Когда PGA37 экспрессировался под индуцибельным контролем, соматические зародыши развивались из корневых эксплантатов и были связаны с повышенной экспрессией LEC1. Эстрадиол-индуцированная экспрессия PGA37 в присутствии ауксина продуцировала зеленовато-желтоватые эмбриональные каллусы через 7-10 дней и соматические эмбрионы при культивировании в течение 3-5 недель.После удаления эстрадиола из среды (что приводит к снижению экспрессии PGA37) соматические зародыши развиваются в здоровые плодородные ростки. Сверхэкспрессия близкородственного гомолога MYB115 в системе, индуцируемой эстрадиолом, также привела к образованию соматических эмбрионов из корневых эксплантатов. предлагает относительно быстрый способ генетической манипуляции [69].Одним из таких примеров является использование морфогенного гена LEC2 для создания трансгенных растений у Theobroma cacao, как описано Shires et al. [53]. Они идентифицировали последовательность фактора транскрипции TcLEC2 и клонировали ее как трансляционное слияние с GR (рецептор глюкокортикоидов), управляемым промотором 35S CaMV. Эту DEX-индуцибельную конструкцию использовали для трансформации ткани семядолей разновидности Scavina-6 и культивировали в течение примерно 6 месяцев для скрининга трансгенных соматических эмбрионов. В соответствии с упорством трансформации в T.cacao был извлечен только один трансгенный эмбрион. Это было распространено путем сегментирования семядолей на несколько частей для получения трансформированных клонами соматических зародышей. Когда ткань этих вторичных эмбрионов помещали на среду без гормонов с добавлением DEX, за 6 дней формировалось несколько эмбрионов. Уровни DEX до 50 мкМ дают наибольшее количество эмбрионов (403) на 100 эксплантов в течение 4 месяцев. В этом эксперименте единственный соматический зародыш превратился в трансгенное растение, которое нормально развивалось.Ткань молодых листьев трансгенного растения 35S :: TcLEC2: GR была способна к плодовитому формированию соматических зародышей в присутствии DEX через 3 месяца, что является многообещающим методом регенерации вторичных трансгенных растений из листового материала. В системе для контроля экспрессии гена WOX две комбинации генов WOX, полученных из арабидопсиса (WOX2 + WOX8 или WOX2 + WOX9), оценивали в присутствии 1 мкМ 2,4-D в течение 10 дней. Обе комбинации привели к значительной регенерации проростков из кусочков листьев Nicotiana tabacum, в отличие от контроля дикого типа, где регенерация проростков не наблюдалась [54].Другой альтернативой являются основанные на эксцизии стратегии контроля экспрессии морфогенных генов. Первая демонстрация этой концепции у двудольных растений была описана у Populus tomentosa с использованием BBM и FLP-рекомбиназы для удаления [55]. Эти авторы разработали конструкцию Т-ДНК, состоящую из одной пары FRT (сайтов-мишеней рекомбинации FLP), фланкирующих как индуцируемый тепловым шоком промотор, управляющий экспрессией рекомбиназы FLP, так и промотор 35S CaMV, управляющий экспрессией кассеты гена BBM Brassica campestris.Используя Agrobacterium-опосредованную трансформацию, 21 каллусную культуру китайского белого тополя трансформировали этой Т-ДНК и культивировали на безгормональной среде. Шесть из 21 каллуса развили в общей сложности 12 соматических зародышей примерно через четыре недели после трансформации, а половина соматических зародышей прорастала с образованием проростков, которые имели карликовый фенотип с небольшими морщинистыми листьями при культивировании в течение 60 дней. Обработка тепловым шоком при 42 ° C в течение 2 часов привела к удалению как кассет рекомбиназы FLP, так и кассет BBM у четырех из шести растений, что привело к повторному появлению нормального фенотипа у регенерированных растений.О первой демонстрации использования морфогенных генов с последующим их удалением для улучшения трансформации однодольных только недавно сообщили Lowe et al. [17]. После опосредованной Agrobacterium трансформации незрелых зародышей инбредной кукурузы Pioneer с нормальным сопротивлением, сильно экспрессируемый ZmBBM (с использованием промотора Zea mays UBIQUITIN) плюс слабо экспрессируемый ZmWUS2 (с использованием промотора Agrobacterium NOPALINE SYNTHASE или NOS) приводил к стимуляции эмбриогенный каллус. Эта комбинация слабо экспрессируемого гена WUS2 и сильно экспрессированного гена BBM привела к высокой частоте трансформации, когда были трансформированы незрелые эмбрионы инбредной кукурузы.Каллюс помещали на сухую фильтровальную бумагу на 3 дня для стимуляции индуцированного высыханием промотора кукурузы от АБК-чувствительного гена (RAB17), управляющего рекомбиназой CRE, который затем эффективно вырезал все три кассеты экспрессии. После удаления трансгенов CRE, WUS2 и BBM все, что осталось в интегрированном локусе Т-ДНК, это гены, представляющие интерес (например, устойчивость к гербицидам и / или ген визуального маркера). Это также улучшило эффективность трансформации во многих других сложных или непокорных генотипах (сложные инбреды кукурузы, сорго, сахарный тростник и рис Indica) и позволило трансформировать эксплантаты, которые ранее не подвергались трансформации, такие как срезы зрелых зародышей (начиная со зрелых сухих семян) или сегменты листьев 7–14-дневных проростков.Этот метод начинает способствовать усиленной трансформации ранее непокорных общественных сортов зерновых, таких как инбред кукурузы B73 и сорт сорго P898012 [56]. Совсем недавно Lowe et al. [57] описали улучшенную систему трансформации кукурузы с использованием двух новых промоторов: промотор кукурузы AXIG1 (индуцируемый ауксином), управляющий WUS2, и промотор кукурузы PLTP (промотор белка переноса фосфолипидов), управляющий BBM. Эта новая конфигурация кассет экспрессии привела к быстрому формированию соматических зародышей в течение 7 дней с прорастанием этих новообразованных соматических зародышей, дающих всходы, готовые для трансплантации в почву и роста в теплице в течение 21-30 дней.Экспрессия обоих промоторов была настолько низкой или ограничивалась конкретными типами клеток (или тканями) в растении, что даже без удаления кассет PLTP :: BBM и AXIG1 :: WUS2 все полученные в результате растения T0 были устойчивыми и фертильными. Эта новая система быстрой трансформации работает на всех протестированных инбредных сортах Pioneer и public, а также на устойчивых сортах сорго и пшеницы.

Повторяющейся темой во всех описанных выше методах трансформации является необходимость контроля экспрессии морфогенных генов для восстановления растений с нормальным фенотипом посредством либо индуцибельной экспрессии, либо регулируемой экспрессии, либо вырезания.В случае индуцибельной или регулируемой онтогенетической экспрессии BBM и WUS2 морфогенные гены и гены признаков связаны в одной конструкции. С другой стороны, конструкции, предназначенные для вырезания, больше и сложнее, но морфогенные гены удаляются до регенерации растений.

Однако существуют две дополнительные альтернативы, позволяющие избежать обеих ловушек. В первом варианте две Т-ДНК вводятся из одной и той же Agrobacterium (содержащей обе плазмиды). Во втором варианте используются две отдельные агробактерии для введения разных плазмид Т-ДНК.Используя любую стратегию, два трансгенных локуса позже отделяются друг от друга [70]. Основа для второго подхода освещена в отчете Florez et al. [29], которые продемонстрировали, что временная экспрессия TcBBM, доставляемая Agrobacterium, была достаточной для стимуляции образования соматических зародышей, без каких-либо указаний на обнаружение кассеты трансгенного BBM в соматических зародышах. Затем авторы предположили, что метод котрансфекции можно использовать для получения трансгенных растений путем смешивания штамма Agrobacterium, содержащего кассету экспрессии BBM, со штаммом, содержащим признаки.Последний вариант использования Agrobacterium для доставки транзиторной активности морфогенных генов основан на обычно наблюдаемой характеристике доставки Т-ДНК, причем многие лаборатории на протяжении многих лет сообщали о явлении считывания границ Т-ДНК [71,72,73,74 ]. Как следует из названия, когда Т-ДНК обрабатывается в Agrobacterium перед доставкой, неэффективный процессинг Т-цепи будет производить некоторый процент молекул Т-ДНК, которые не обрываются точно на левой границе (LB), но продолжают включать последовательность за пределами LB.Чтобы уменьшить этот тип нежелательного считывания, исследователи использовали отрицательные селектируемые маркеры [72], расположенные за пределами LB (вне Т-ДНК), чтобы устранить клетки растений, которые интегрировали эти последовательности. Другие пытались использовать неэффективный процессинг Т-цепи путем размещения положительного маркерного гена за пределами LB, который можно было бы использовать временно, получая селектируемые безмаркерные трансгенные растения [75]. Если поместить ген IPT, полученный из Agrobacterium, за пределы LB, многие клетки получат смесь Т-ДНК, при этом большая часть Т-цепей будет обработана должным образом (только с указанием признака), но с меньшим процентом Т-цепей, которые не будут обрабатываться. правильно оканчивается на LB, таким образом, содержащий фланкирующий ген IPT.В этих клетках временная экспрессия IPT будет стимулировать продукцию цитокининов и пролиферацию побегов, и когда процессированная Т-цепь интегрирована, а Т-цепь, содержащая IPT, не интегрирована, это приведет к выделению содержащих признаки трансгенных растений, которые не содержат селектируемых растений. Поскольку не сообщалось о том, что пролиферация побегов в ответ на экспрессию IPT происходит в кукурузе и других зерновых культурах, мы протестировали только WUS2 или WUS2 + BBM на временное образование соматических зародышей и последующее прорастание для получения растений T0 путем размещения этих кассет вне LB [76].Это привело к простому неэкцизионному методу использования WUS2 и BBM для трансформации устойчивых генотипов кукурузы, который использует неэффективность как обработки Т-цепей, так и интеграции, чтобы обеспечить быстрое преобразование кукурузы с одновременным обогащением для событий без интеграции WUS2 или BBM. Например, опосредованная Agrobacterium доставка Т-ДНК в инбредный Ph2V69 кукурузы Pioneer очень эффективна; однако без кассет экспрессии BBM и WUS2, присутствующих в Т-ДНК, до сих пор оказалось невозможным восстановить трансгенные растения Т0.Используя инбредный Ph2V69, трансформацию проводили с использованием штамма Agrobacterium LBA4404, содержащего единственную плазмиду Т-ДНК [76]. Были протестированы две версии, каждая из которых содержала две кассеты экспрессии «ложных признаков» в Т-ДНК, промотор UBIQUITIN, полученный из Setaria italica, управляющий экспрессией зеленого флуоресцентного белка, и кассета устойчивости к гербицидам, содержащая промотор сорго двухцветной ацетолактат-синтазы (ALS). управляющая экспрессия HRA (мутантный ген ALS кукурузы, придающий устойчивость к гербицидам сульфонилмочевины).Для первой обработки две кассеты экспрессии также были расположены вне LB Т-ДНК, с промотором PLTP, управляющим WUS2, и промотором PLTP, управляющим экспрессией BBM (WUS2 / BBM). Во второй обработке только PLTP :: WUS2 был размещен вне LB (только WUS2). Инфекцию Agrobacterium, покой, соматическое созревание эмбриона и регенерацию проводили, как описано в Lowe et al. [57] и растения T0 были проанализированы на наличие маркерных генов плюс WUS2 и BBM (если применимо) с помощью кПЦР.Начиная с 196 незрелых эмбрионов в каждой обработке, после анализа было обнаружено, что частота растений T0 (относительно числа начальных незрелых эмбрионов), которые были однокопийными для маркерных генов и были отрицательными для WUS2 и BBM (если применимо), была 12,2% и 10,2% для лечения «только WUS2» и «WUS2 / BBM» соответственно. Процент растений T0, которые содержали либо BBM / WUS2, либо только WUS2 (в зависимости от обработки), составлял 49% и 38% соответственно [76]. Это говорит о том, что хотя «сквозные» копии WUS2 или WUS2 / BBM явно оказывали положительное влияние с точки зрения стимуляции образования соматических зародышей, также имела место некоторая неизбежная интеграция последовательностей Т-ДНК, которые также несли фланкирующую последовательность (' backbone 'из плазмиды, содержащей Т-ДНК Agrobacterium).Это ожидаемо, и, следовательно, метод требует скрининга ПЦР для выявления идеальных однокопийных событий Т-ДНК. Однако следует также отметить, что частота восстановления идеальных однокопийных событий была сравнима с частотой, наблюдаемой для метода удаления для этого инбреда [17]. Это представляет собой жизнеспособную альтернативу вырезанию как средству создания высококачественных трансгенных объектов в непокорных однодольных культурах, не содержащих гены-помощники (в данном случае WUS2 и BBM). Анализ

транскриптомов открывает новое понимание молекулярных механизмов соматического эмбриогенеза у Hevea brasiliensis

Предпосылки : Соматический эмбриогенез (SE) - многообещающая технология вегетативного размножения растений, которая играет важную роль в селекции деревьев.Хотя каучуковое дерево ( Hevea brasiliensis, Muell. Arg.) SE было основано, было идентифицировано несколько поздних SE-родственных генов, а механизмы молекулярной регуляции поздних SE все еще недостаточно изучены.

Результаты: В этом исследовании транскриптомы эмбриогенного каллуса (EC), первичного эмбриона (PE), семядольного эмбриона (CE), аномального эмбриона (AE), зрелого семядольного эмбриона (MCE) и увядшего аномального эмбриона (WAE) были проанализированы. Всего было произведено 887 852 416 чистых чтений, 85.92% из них были сопоставлены с геномом каучукового дерева . Сборка de novo сгенерировала 36937 унигенов. Дифференциально экспрессируемые гены (DEG) были идентифицированы при попарных сравнениях CE против AE и MCE против WAE, соответственно. Специфические общие ДЭГ в основном участвовали в сигнальном пути фитогормонов, биосинтезе фенилпропаноидов и метаболизме крахмала и сахарозы. Среди них гены, связанные с трансдукцией гормонального сигнала, были значительно обогащены, особенно сигнальные факторы ауксина ( AUX-like1 , Gh4.1 , SAUR32-подобный , IAA9-подобный , IAA14-подобный , IAA27-подобный , IAA28-подобный и ARF5-подобный ). Факторы транскрипции, включая WRKY40 , WRKY70 , MYBS3-like , MYB1R1 -, такие как , AIL6 и bHLH93-like , были охарактеризованы как молекулярные маркеры для SE 9024 позднего каучукового дерева. CML13 , CML36 , CAM-7 , SERK1 и LEAD-29-подобный также были связаны с поздним SE.Кроме того, модификация гистонов играет решающую роль во время поздней SE каучукового дерева.

Выводы: Это исследование предоставляет важную информацию для выяснения молекулярной регуляции во время позднего СЭ каучукового дерева.

Ключевые слова

Hevea brasiliensis, Соматический эмбриогенез, РНК-seq, гормональный сигнал, фактор транскрипции, модификация гистона

Профилирование транскриптов на ранних стадиях развития эмбриона сосны обыкновенной | BMC Plant Biology

Обзор транскриптома в семенах

Для идентификации транскриптов и биологических процессов, вовлеченных в ранний зиготический эмбриогенез у сосны обыкновенной, РНК была выделена из эмбрионов и мегагаметофитов, представляющих четыре стадии развития (рис.1). Девять библиотек РНК-seq секвенировали с использованием технологии секвенирования 454 Roche. В общей сложности было сгенерировано 6,6 миллиона необработанных считываний, в результате чего было получено 121 938 транскриптов с различной длиной от 150 до 18 101 п.н. и средней длиной 1242 п.н. (Дополнительный файл 1: таблицы S1, S2, S3 и S4).

Всего в транскриптоме семян было идентифицировано 36 106 транскриптов, содержащих ORF, из которых 28 190 транскриптов (78%) имели существенное выравнивание с базой данных Arabidopsis thaliana, TAIR10 и 7404 транскрипта (20%) с базой данных факторов транскрипции растений (таблица 1).26 743 транскрипта (74%) имели аннотированные термины GO по крайней мере в одной из трех основных категорий: 22 362 транскрипта (60%) отображали одну или несколько онтологий, связанных с биологическим процессом, 24 259 (67%) с молекулярной функцией и 19 301 (53%) в компонент ячейки.

Таблица 1 Сводка данных транскриптома семян RNA-seq Значения экспрессии

транскриптов были рассчитаны как RPKM, что дало 81 120 собранных транскриптов с детектируемыми сигналами экспрессии (RPKM> 0), по крайней мере, на одной из стадий развития (таблица 1).74 150 и 59 526 транскриптов были обнаружены у эмбрионов и мегагаметофитов соответственно. Большинство транскриптов (65%) было обнаружено в обеих тканях, однако количество уникальных транскриптов было в три раза выше у эмбрионов, чем у мегагаметофитов (рис. 2а). Количество идентифицированных факторов транскрипции (TF) также было выше у эмбрионов (рис. 2b).

Рис. 2

Диаграмма Венна, демонстрирующая общее количество транскриптов и ТФ, обнаруженных у эмбрионов и мегагаметофитов. Числа на пересечении представляют транскрипты / TF, обнаруженные как у эмбрионов, так и у мегагаметофитов. a Все обнаруженные транскрипты (RPKM> 0) в транскриптоме семян. b Количество ТФ (RPKM> 0), обнаруженных в транскриптоме семян

Общее количество транскриптов, обнаруженных на каждой стадии развития во время развития семян, увеличивалось у эмбрионов, но уменьшалось у мегагаметофитов (Таблица 2). Около 15000 транскриптов были экспрессированы на всех стадиях развития как у эмбрионов, так и у мегагаметофитов. Количество уникальных транскриптов, обнаруженных на определенных стадиях развития, было довольно постоянным у эмбрионов, но уменьшилось у мегагаметофитов во время развития семян с 10 907 транскриптов на стадии M1 до 3201 транскриптов на стадии M4 (дополнительный файл 1: Рисунок S1A и B).Из 7404 TF, идентифицированных во время раннего развития эмбриона, 3734 TF (50%) были обнаружены на всех стадиях развития, и около 140 TF были обнаружены только на одной стадии развития (дополнительный файл 1: Рисунок S1C). У мегагаметофитов 3775 TF (56%) были обнаружены на всех стадиях развития, однако количество TF, обнаруженных только на одной стадии развития, уменьшилось во время развития семян (дополнительный файл 1: Рисунок S1D).

Таблица 2 Количество транскриптов и ТФ, обнаруженных у эмбрионов и мегагаметофитов на разных стадиях развития (RPKM> 0)

Чтобы проверить надежность результатов РНК-seq, 30 транскриптов (23 транскрипта в эмбрионах и 7 транскриптов в мегагаметофитах) были отобраны для исследования с помощью qRT-PCR.Коэффициент корреляции Пирсона между профилями экспрессии, полученными с помощью RNA-seq и qRT-PCR, рассчитывали для каждого транскрипта отдельно (дополнительный файл 2: таблица S6). Полученный коэффициент корреляции был аналогичным для большинства транскриптов, за исключением нескольких транскриптов в некоторые моменты времени.

Изменения в накоплении транскриптов во время развития семян

Дифференциально экспрессируемые транскрипты при попарных сравнениях между эмбрионами и мегагаметофитами во время развития семян

Для идентификации дифференциально экспрессируемых транскриптов (DET) мы провели попарные сравнения между эмбрионами и мегагаметофитами на одной и той же стадии развития.Всего 18 638 транскриптов были активированы с кратным изменением более 2 (FC> 2) по крайней мере в одном из парных сравнений между эмбрионами и мегагаметофитами (дополнительный файл 3: рисунок S2A, дополнительный файл 4). 12 906 транскриптов были активированы у эмбрионов и 5732 - у мегагаметофитов. Наибольшая разница в количестве активированных транскриптов между эмбрионами и мегагаметофитами наблюдалась на стадии развития 2 (дополнительный файл 3: рисунок S2B).

Около 54% ​​DET, активируемых в эмбрионах, и 58% DET, активируемых в мегагаметофитах, могут быть аннотированы GO (дополнительный файл 3: Рисунок S2A).Клеточные и метаболические процессы были наиболее доминирующими группами в категории биологических процессов как у эмбрионов, так и у мегагаметофитов (рис. 3). Кроме того, транскрипты, назначенные для ответа на стимул, были чрезмерно представлены в мегагаметофитах. Как у эмбрионов, так и у мегагаметофитов, обогащенные термины GO в категории «Молекулярные функции» включали каталитическую и связывающую активности, а в категории «клеточный компонент» подкатегории «клетка» и «клеточная часть» были наиболее распространенными.

Рис. 3

Анализ аннотации GO дифференциально экспрессируемых транскриптов (DET) в эмбрионах и мегагаметофитах.Анализ включал общее количество DET с кратностью изменения более 2 (FC> 2) в любом из парных сравнений между эмбрионами и мегагаметофитами. Представленные данные показывают процент транскриптов, относящихся к общему количеству транскриптов, используемых в качестве входных в каждой подкатегории GO (уровень 2) в эмбрионах (оранжевый) и в мегагаметофитах (зеленый), с использованием инструмента

WEGO (Web Gene Ontology Annotation Plot).

Путем увеличения уровня аннотации GO было обнаружено, что транскрипты, активируемые в эмбрионах, были обогащены для различных биологических процессов, таких как биогенез клеточных компонентов, а также клеточные и метаболические процессы, связанные с организацией хромосом, упаковкой ДНК, трансляцией и экспрессией генов (рис.4a и Дополнительный файл 3: Рисунок S3). В мегагаметофитах активированные транскрипты были сильно обогащены в ответ на стимул, такой как реакция на стресс, а также на химический и эндогенный стимул, включая реакцию на абсцизовую кислоту (ABA) (рис. 4b и дополнительный файл 3: рис. S4). В категории «Молекулярная функция» присвоения эмбрионов были в основном связаны со связыванием ДНК и структурной составляющей рибосомы. Обе активности тесно связаны с экспрессией генов и синтезом белка.В мегагаметофитах транскрипты, участвующие в деятельности резервуаров питательных веществ, были широко представлены (FDR = 2,82e-92). Транскрипты, идентифицированные в эмбрионах для категории клеточных компонентов, показали обогащение по ядру, рибосомам и комплексу белок-ДНК (рис. 4a), а транскрипты в мегагаметофитах были в основном обогащены компонентом белкового тела (рис. 4b). Как и ожидалось, активация транскриптов у эмбрионов демонстрирует обогащение ГО для различных клеточных процессов и функций в упаковке ДНК, трансляции и экспрессии генов.Эти процессы важны при активной пролиферации клеток [29]. Транскрипты, активированные в мегагаметофитах, были обогащены для накопления запасного материала и ответа на химические и эндогенные стимулы. Это может указывать на то, что мегагаметофит, подобно эндосперму, может воспринимать сигналы окружающей среды и индуцировать соответствующие сигнальные пути для регуляции развития эмбриона [30].

Рис. 4

Резюме анализа обогащения онтологией генов (GO) для дифференциально экспрессируемых транскриптов во время раннего развития семян.Анализ включал DET с кратным изменением более 2 (FC> 2), выявленных в любом из парных сравнений между эмбрионами и мегагаметофитами. Наиболее распространенные классы в каждой категории, биологический процесс, молекулярная функция и клеточный компонент показаны для эмбрионов a, и мегагаметофитов b, . Уровень обогащения пропорционален интенсивности цвета. Значения FDR указаны в скобках. Подробная информация представлена ​​в Дополнительном файле 3: Рисунки S2 и S3

Мы провели попарные сравнения между группой транскриптов, показывающих самые высокие различия в численности между эмбрионами и мегагаметофитами на каждой стадии развития (дополнительный файл 5).Транскрипты, относящиеся к членам семейства генов цитохрома P450 Arabidopsis ( CYP78A7 , CYP78A8 и CYP71B22 ), показали на всех стадиях развития высокое накопление в эмбрионах, но низкое накопление или его отсутствие (RPKM близко к 0) в мегагаметофитах. Активированные транскрипты в мегагаметофитах были в основном родственны семейству запасных белков семян Arabidopsis 12S ( CRB , CRC , CRD ), также известных как круциферины. Эти белки участвуют в деятельности резервуаров питательных веществ и являются основными источниками азота и углерода во время раннего прорастания семян [31].Значения RPKM транскриптов, связанных с круциферином, были сходными на всех стадиях развития. Большинство транскриптов, активированных в мегагаметофитах, не имели совпадений с базой данных TAIR (дополнительный файл 5).

На стадии E1, E2 и E3DO были обнаружены транскрипты, относящиеся к генам, кодирующим модификации клеточной стенки (экспансины, метаболизм целлюлозы, эндоглюканаза, пектин-ацетилэстераза и пектин-лиаза). В частности, на стадии E1 предполагаемый гомолог СОМАТИЧЕСКОГО ЭМБРИОГЕНЕЗНОГО РЕЦЕПТОРА КИНАЗА1 ( SERK1 ) , , а также транскрипты, связанные с генами, участвующими в ответе на ауксин и другие гормоны, такие как ИНДОЛЕРАЦЕТАТ-ОРЕЦЕТАТ ( IAMT1 ), SKP1-LIKE PROTEIN 1A ( SKP1A ), ГАММА-ВАКУОЛЯРНЫЙ ФЕРМЕНТ ( GAMMA-VPE ) , GULBEREDELLIN , GULBEREDELLA ГЛУТАТИОН-S-ТРАНСФЕРАЗА U17 ( GSTU17 ) были в большом количестве (дополнительный файл 5, вверх в E1).Транскрипты, связанные со сборкой нуклеосом (гистоны), были обнаружены на всех стадиях развития, кроме стадии E1. Другие транскрипты, активируемые со стадии 2 и далее, кодируют белки, связанные со стрессовыми ответами, то есть неспецифический БЕЛК-ПЕРЕДАЧИ ЛИПИДОВ 3 ( LTP3 ) , БЕЛК ДЛЯ ПЕРЕНОСА САХАРА 13 ( STP13 ) или АБСЦИЗНАЯ КИСЛОТА 4 INSENSITIVE ( ABI4 ). Транскрипты, активированные на стадии E4, включали транскрипты, связанные с передачей сигналов клеток, негативной регуляцией клеточного деления и разрыхлением клеточной стенки, а также транскрипты, связанные с развитием, такие как PROTEIN RALF-like 34 ( RALFL34 ), FAMA, PLANTACYANIN ( ARPN ) или ПЕКТИНАЦЕТИЛЭСТЕРАЗА ( PAE9 ) (дополнительный файл 5, вверх в E4).

Всего на ранних стадиях развития семян было обнаружено 7704 ТФ (Таблица 1). Из этих TF 2890 дифференциально экспрессировались с кратным изменением выше двух между эмбрионами и мегагаметофитами (дополнительный файл 6). Дифференциально экспрессируемые TF принадлежали 78 семействам, из которых семейства bHLH, FAR1, TRAF и NAC были самыми крупными (Дополнительный файл 7: Рисунок S5 и Дополнительный файл 6, Распределение семейств). В целом количество ТФ, принадлежащих к каждому семейству, было выше у эмбрионов, чем у мегагаметофитов.Интересно, что некоторые из семейств TF по-разному обогащались эмбрионами и мегагаметофитами во время развития семян, например для bHLH, C3H, NAC, AP2-EREBP и TRAF (дополнительный файл 7: рисунок S6). Кроме того, шестнадцать семейств TF были обнаружены только у эмбрионов, а четыре семейства TF - только у мегагаметофитов. В целом несколько ТФ, принадлежащих к семействам, специфически экспрессируемым в эмбрионах, участвовали в росте и развитии растений, тогда как семейства ТФ, обнаруженные только у мегагаметофитов, были связаны с ответами на стресс и другие стимулы [32–34].

Дифференциально экспрессируемые транскрипты во время развития эмбриона

Всего при попарных сравнениях эмбрионов на разных стадиях развития было идентифицировано 18 234 DET с кратным изменением выше двух (дополнительный файл 8: рисунок S7). При включении только транскриптов с RPKM> 10 было обнаружено 6669 DET. Чтобы обеспечить обзор паттернов экспрессии этих DET во время развития эмбриона, был проведен кластерный анализ k-средних (DET от подчиненных эмбрионов были исключены из этого анализа).Было обнаружено четыре типа профилей экспрессии, при этом типы I и II включают по четыре кластера каждый, а типы III и IV включают два кластера (рис. 5). Накопление транскриптов, принадлежащих к типу I, увеличивалось на протяжении всего развития эмбриона. Транскрипты в кластере 1 и 8 были специально обогащены для процессов, связанных с реакцией на абиотический стресс, а транскрипты в кластере 3 и 7 были высоко обогащены для активности резервуаров питательных веществ (FDR = 2.10e-47), ответа на АБК и другие гормоны.Экспрессия транскриптов типа II снижалась во время развития эмбриона. Однако схема накопления различалась в четырех кластерах. Транскриптов в кластере 9 и 12 было много для модификации клеточной стенки, токсинов и процессов метаболизма углеводов, в то время как кластер 11 включал большее количество транскриптов с функцией в структурных составляющих рибосом. Транскрипты типа III показали высокое накопление только на одной промежуточной стадии развития (E2 или E3DO). Транскрипты в кластере 5, в основном накапливаемые на стадии E2, были высоко обогащены для активности резервуаров питательных веществ.Однако для кластера 4 не было получено значительного обогащения ГО. Уровень экспрессии транскриптов типа IV был либо высоким, либо низким на стадиях E2 и E3DO. Кластер 2 включал транскрипты, участвующие в упаковке ДНК и сборке комплекса белок-ДНК. Вместе анализ кластеров с обогащением GO показал, что количество транскриптов, связанных с реакцией на стресс и питательной активностью, увеличивается во время развития эмбриона, в то время как количество транскриптов, связанных с модификацией клеточной стенки, снижается.

Рис. 5

Кластеризация дифференциально экспрессируемых транскриптов, выявленных при попарных сравнениях между стадиями развития эмбриона. Анализ включал DET с FC> 2 и RPKM> 10. Для каждого транскрипта значения RPKM были нормализованы до максимального значения RPKM во время развития эмбриона. Нормализованные значения были подвергнуты методу кластеризации k-средних и классифицированы в 12 различных кластеров в зависимости от уровня их экспрессии на четырех стадиях развития. Ось Y и X представляют относительную экспрессию (от 0 до 1) и различные стадии развития эмбриона, соответственно.Расширенные процессы и функции и их уровень обогащения (FDR) представлены для каждого кластера. Степень обогащения пропорциональна интенсивности цвета

При сравнении эмбрионов на последовательных стадиях развития, включая подчиненные эмбрионы, было обнаружено 4411 DET. Наибольшее количество DET (2667) было обнаружено при сравнении между эмбрионами на стадии E1 и E2, и 80% (2152) этих DET были обнаружены только в этом попарном сравнении (рис. 6a и b).ДЭТ, сильно накапливаемые на стадии E1, были обогащены биологическими процессами, связанными с разрыхлением, организацией и модификацией клеточной стенки, с транскриптом, связанным с бета-экспансином ( EXPB1 ), имеющим наивысшую кратность изменения (дополнительный файл 9, E1xE2 Up). Кроме того, было обнаружено 28 ТФ, участвующих в нескольких процессах развития, из которых транскрипты, относящиеся к LOB-ДОМЕННО-СОДЕРЖАЩИМ БЕЛКАМ 29 ( LBD29 ) и SERK1, , а также некоторым членам семейства белков гомеобокса-лейциновой молнии. ( HAT5 и HB13 ), показали высокую кратность изменения (Дополнительный файл 8: Таблица S7 и Дополнительный файл 10, E1xE2 Up).Транскрипты, которые были чрезмерно представлены в E2, были обогащены процессами, связанными с ответом на ABA, гормональный стимул, организацию нуклеосом и активность резервуаров питательных веществ (дополнительный файл 9, E1xE2 Down). Эти DET включали 21 TF, которые были аннотированы GO для процессов развития (дополнительный файл 8: таблица S7 и дополнительный файл 10, E1xE2 Down).

Рис. 6

Дифференциально экспрессируемые транскрипты (DET) между последовательными стадиями во время развития эмбриона. Анализ включал DET с FC> 2 и RPKM> 10, идентифицированными в любом из четырех парных сравнений. a Гистограмма, показывающая количество регулируемых с повышением (красные столбцы) и подавления (зеленые столбцы) DET между последовательными стадиями развития. b Диаграмма Венна, показывающая количество общих и специфических DET между последовательными попарными сравнениями

При сравнении эмбрионов на стадии E2 и E3DO было идентифицировано около 660 DET (рис. 6a). Транскрипты, назначенные для ответа на АБК и гормональный стимул, показали более высокое накопление на стадии E2, а те, которые участвовали в реакции на абиотический стресс, были обогащены на стадии E3DO (дополнительный файл 9, E2xE3DO).При сравнении доминантных эмбрионов на стадии E3DO и стадии E4 было обнаружено 1087 DET (рис. 6a). Транскрипты, активируемые в эмбрионах E3DO, в основном связаны с процессами спецификации оси, тогда как транскрипты, активируемые на стадии E4, участвуют в процессах, связанных с ответом на гормональный стимул и транспортом липидов ( LTP3 и LTP4 ) (дополнительный файл 9, E3DOxE4 вниз). ТФ, дифференциально экспрессируемые в эмбрионах на стадии E3DO и E4, которые были аннотированы для процессов развития, включали транскрипты, относящиеся к AUXIN RESPONSIVE FACTOR 2 ( ARF2 ), LEUNIG ( LUG ), WUSCHEL-RUSCHEL ( WOX ), CYP78A7 и ARABIDOPSIS NAC ДОМЕН, СОДЕРЖАЩИЙ БЕЛК 9 ( ANAC009 ) (дополнительный файл 8: таблица S7 и дополнительный файл 10).

Сравнивая доминантные и подчиненные эмбрионы на стадии E3, можно было обнаружить 748 DET (рис. 6a). Многие из транскриптов, активируемые у доминантных эмбрионов, были связаны с процессами углеводного метаболизма и процессами спецификации оси (дополнительный файл 9, E3DOxE3SU Up). DETs, обогащенные подчиненными эмбрионами, участвовали в реакции на водный стресс (включая водную депривацию) и транспорт липидов. NAC и HB были самыми крупными семействами TF в доминантных эмбрионах, в то время как у подчиненных MYB-факторов были наиболее распространены (дополнительный файл 10, семейства TF).

Схематическое резюме результатов, полученных в результате попарных сравнений между последовательными стадиями развития эмбриона, представлено на рис. 7. Вместе наши результаты показывают, что процессы, участвующие в модификациях клеточных стенок, передаче сигналов гормонов, спецификации оси и индуцированных стрессом ответах, являются активируется на раннем этапе развития эмбриона. Строгая регуляция клеточного деления, удлинения и адгезии имеет решающее значение во время формирования эмбрионального паттерна. Ауксин, возможно, является наиболее распространенной сигнальной молекулой у растений и участвует во многих процессах развития, включая эмбриогенез как у покрытосеменных, так и у хвойных [35–37].В нескольких исследованиях было показано, что гены, связанные со стрессом, чрезмерно представлены на раннем этапе развития эмбриона [12, 16, 17, 38]. Более того, многие из дифференциально экспрессируемых TF, которые принадлежат к самым большим семействам (bHLH, FAR1, NAC и AP2-EREBP), связаны с клеточными и онтогенетическими процессами, передачей сигналов гормонов и стрессовыми ответами [39–42].

Рис. 7

Схематическое резюме результатов, полученных в результате попарных сравнений между последовательными стадиями развития эмбриона (также см. Дополнительные файлы 9 и 10).( a ) Количество обнаруженных DET; ( b ) Биологические процессы, обогащенные GO; ( c ) Количество выявленных ТФ

Дифференциально экспрессируемые транскрипты на разных стадиях развития мегагаметофитов

DET, идентифицированные при попарных сравнениях мегагаметофитов на последовательных стадиях развития, также были подвергнуты кластеризации k-средних, в результате чего было получено 12 различных кластеров, сгруппированных в пять типов профилей экспрессии (дополнительный файл 11: Рисунок S8).Никаких значимых процессов или функций обогащения GO (FDR <0,05) не было назначено ни одному из кластеров. Накопление транскриптов типа I увеличивалось от стадии M1 до стадии M4. Транскрипты, относящиеся к ответу на стимул и регуляции биологического процесса, были наиболее многочисленными. Экспрессия транскриптов типа II снижалась от стадии M1 до стадии M4. Кластеры типа II были в изобилии в транскриптах с терминами GO, связанными с организацией клеточной стенки, а также репродуктивными процессами и процессами развития.Транскрипты III типа накапливались либо на стадии M2, либо на стадии M3. Термины GO, присвоенные кластерам в типе III, в основном связаны с реакцией на стимул. Типы IV и V включали только по одному небольшому кластеру каждый. Кластер 6, с транскриптами, накапливающимися как на стадиях M2, так и M3, показал высокий процент DET, отвечающих на стимул, в то время как транскрипты из кластера 11 были аннотированы только для метаболических и клеточных процессов.

Всего при попарных сравнениях мегагаметофитов на последовательных стадиях развития было обнаружено 600 DET (FC <2, RPKM> 10).Ни в одном из парных сравнений не было обнаружено значимых обогащенных процессов или функций. Подобно эмбрионам, наибольшее количество DET было обнаружено во время перехода от стадии M1 к M2, и 85% DET были специально обнаружены в этом попарном сравнении (дополнительный файл 11: рис. S9A и B). Количество транскриптов, аннотированных для процессов развития, уменьшилось с 10 на стадии M1 до 2 на стадии M4. Между тем, количество DET с условиями GO, связанными с реакцией на стресс и стимул, оставалось более постоянным (дополнительный файл 11: рисунок S9C).Кроме того, транскрипты, кодирующие белки, принадлежащие к небольшому семейству белков теплового шока (sHSP), известному своей ролью в реакции на стресс, демонстрировали аналогичное накопление на всех стадиях развития (дополнительный файл 12, M1xM2 Down, M2xM3 Up).

Десять DET с назначенными GO-терминами, относящимися к развитию, были специально обнаружены на стадии M1, в которую были включены предполагаемые гомологи экспансинов ( EXPB1 s) и AGAMOUS-like MADS-box ( AGL11 ). AGL11 не обнаружен у эмбрионов ни на одной стадии развития.Соответственно, AGL11 экспрессировался в эндосперме, но не в эмбрионах Brachypodium distachyon (данные атласа экспрессии из EMBL-EBI). Несколько транскриптов, связанных с транспортом ионов металлов, например Copper Transporter 5 ( COPT5 ) и Zinc Transporter 11 ( ZIP11 ) , были обнаружены на этапе M1 (дополнительный файл 12, M1xM2 Up). Транспортеры ZIP, участвующие в транслокации ионов во время развития зародыша и эндосперма, были обнаружены в семенах кукурузы [43].На стадии M4 транскрипт, относящийся к AtEP3, , кодирующий эндохитиназу, был очень распространенным (дополнительный файл 12, M3xM4 Down). Было показано, что гомологичный ген Chia4-Pa1 экспрессируется в однослойной зоне, окружающей коррозионную полость мегагаметофита в семенах ели европейской [44].

Экспрессия выбранных транскриптов во время раннего развития эмбриона

Уровни транскриптов выбранных DET тестировали с помощью qRT-PCR в четырех биологических повторностях.Выбор был основан на предполагаемой экспрессии (значения RPKM), полученной из данных транскриптома и функциональных аннотаций гомологичных генов у других видов, в основном Arabidopsis, которые были связаны с развитием эмбриона. Информация о последовательности генов у хвойных деревьев ограничена, поэтому для удобства мы относим каждый транскрипт хвойных деревьев к гену Arabidopsis, с которым он имеет наибольшее сходство в последовательности. Мы использовали этот подход, чтобы дать возможность получить общее представление о том, какие процессы могут быть важны на раннем этапе развития эмбриона.Результаты, полученные в результате анализа qRT-PCR, представлены на рис. 8.

Рис. 8

Количественный анализ в реальном времени (qRT) -PCR относительного уровня транскриптов выбранных генов во время раннего развития эмбриона. Относительные уровни экспрессии, оцененные методом Ливака (2-ΔΔCt), относятся к стадии развития, показывающей минимальное накопление для каждого транскрипта. Значения экспрессии нормализованы по двум эталонным генам ФАКТОР-1 ЭЛОНГАЦИИ (EF1) и ФОШОГЛЮКОМУТАЗЫ (PHOS).Уровни транскриптов представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех или четырех биологических повторов, с двумя техническими повторами в каждой. Разные буквы указывают на значительные различия в относительном уровне экспрессии (t-критерий Стьюдента, P <0,05)

Транскрипты, относящиеся к ENDO-BETA-MANNASE 7 ( MAN7 ), TRANSPARENT TESTA7 ( TT7 ), EXPB1 , SERK1 , LTP4 HAP, и LTP4 HAP были в большом количестве, а LTP4 HAP были в большом количестве, а LTP4 HAP были в изобилии. и значительно снизился на стадии E2.

В семенах Arabidopsis ген, кодирующий маннаназу, AtMAN7, экспрессируется в эндосперме микропилар и в кончике корешка непосредственно перед появлением корешка [45]. Мы предполагаем, что высокая экспрессия PsMAN7 в эмбрионах E1 может способствовать их проникновению в питательный мегагаметофит.

Ранний эмбриогенез является критической фазой развития, когда апикально-базальная полярность устанавливается посредством направленного транспорта ауксина, главным образом опосредованного притоком ауксина и переносчиками оттока [46].Кроме того, флавонолы могут действовать как негативные регуляторы транспорта ауксина [47]. AtTT7 кодирует флавоноид-3'-гидроксилазу, фермент биосинтеза флавонолов. Подавление PsTT7 на стадии E2 может отражать то, что транспорт ауксина увеличивается на стадии расщепления и во время дальнейшего развития эмбриона. Предыдущие исследования связывали действие экспансинов на разрыхление, расширение, расслоение или разделение клеточной стенки [48, 49]. Высокая экспрессия PsEXPB1 на стадии E1 может указывать на важность разрыхления клеточных стенок, чтобы сделать возможным разделение четырех ранних эмбрионов. AtSERK1 маркирует клетки, которые компетентны формировать эмбрионы, а также влияет на способность клеток дифференцироваться в эмбрионы [50]. Высокая экспрессия PsSERK1 на стадии E1 может быть важна для стимуляции четырех апикальных клеток к дифференцировке в отдельные эмбрионы и тем самым стимулировать запуск процесса дробления. Сразу после первого дробления четыре новых эмбриона должны развиваться дальше. Мы предполагаем, что понижающая регуляция PsSERK1 важна для блокирования второго раунда расщепления.

Другой набор транскриптов, представленных предполагаемыми гомологами CYP78A7 , DWARF IN LIGHT 1 ( DFL1 ) и ROP-INTERACTIVE CRIB MOTIF-CONTAINING PROTEIN 3 ( RIC3 ) стадия E1, но постепенно снижалась на более поздних стадиях развития.

Цитохром P450 участвует в метаболизме большинства фитогормонов и многих вторичных метаболитов в растительных клетках. Сверхэкспрессия члена семейства CYP78A в рисе ( Oryza sativa ) способствует пролиферации клеток, но уменьшает размер эмбрионов [51].Более того, продукт гена AtDFL1 , который участвует в передаче сигнала ауксина, может ингибировать удлинение клеток [52]. До развития доминирующего эмбриона четыре ранних эмбриона имеют одинаковый размер. Хотя неизвестно, какие механизмы ограничивают рост эмбриональной массы эмбрионов на стадии 2, наши результаты показывают, что PsCYP78A и PsDFL1 могут быть вовлечены. AtRIC3 важен для роста кончиков пыльцевых трубок [53]. Ранние зародыши у Pinus, , развивающиеся после процесса дробления, начинают свое развитие за счет роста апикальных клеток [7].Высокая экспрессия PsRIC3 на стадиях E1 и E2 может отражать, что эти эмбрионы развиваются путем роста апикальных клеток.

Уровень транскриптов, относящихся к NAC009 , FAMA , PROTODERMAL FACTOR2 ( PDF2 ) , и VIVIPAROUS1 ( VP1 на более поздних стадиях, ) был низким на стадии E. Предполагаемые гомологи PLANTACYANIN ( ARPN ) и GLYOXALASE I ( GLOI ) показали более высокое накопление на стадии E3DO.Кроме того, пик обилия транскриптов в подчиненных эмбрионах наблюдался для транскриптов, относящихся к WOX2 , WOX8 / 9 , AINTEGUMENTA-like 5 ( PsAIL5), PHOSPHOGLUCAN WATER DIKINASE () PY. -ИНОЗИТОКСИГЕНАЗА 1 ( MIOX1 ), ALFIN-подобный 3 ( AL3 ) и транскрипт, кодирующий белок, связанный с покоем ауксина.

ANAC009 экспрессируется в стволовых клетках корневого чехлика, где он способствует делению периклинальных клеток [54].FAMA, основной белок спираль-петля-спираль, регулирует критический переключатель между делением и дифференцировкой во время развития устьиц [55]. У европейской ели апикально-базальная поляризация во время раннего эмбриогенеза происходит за счет образования меристематических клеток эмбриональной массы и терминально дифференцированных, разрастающихся клеток суспензора [56]. Высокая экспрессия PsNAC009 и PsFAMA на стадии E3DO и E4, но не на стадии E3SU, может отражать важность правильного паттерна клеточного деления для развития доминантных эмбрионов. PaWOX8 / 9 регулирует ориентацию плоскости клеточного деления в базальной части эмбриональной массы во время раннего и позднего эмбриогенеза у европейской ели [57]. В соответствии с этим, PsWOX8 / 9 экспрессировался на всех проанализированных стадиях развития, однако экспрессия была значительно выше на стадии E3SU. Хотя мы не знаем, как избыточная экспрессия PaWOX8 / 9 влияет на раннее развитие эмбриона, есть соблазн предположить, что высокая экспрессия PsWOX8 / 9 в подчиненных эмбрионах подавляет дальнейшее развитие эмбрионов или является только следствием блокирования эмбрионов. развитие, вызванное другими факторами.В растениях Arabidopsis, сверхэкспрессирующих AtARPN , эндотеций дегенерирует, вероятно, как следствие индуцированной плантацианином преждевременной PCD [58]. Терминально дифференцированные суспензионные клетки у ранних зародышей сосны обыкновенной и ели европейской элиминируются с помощью ПКС [9, 59]. Высокая экспрессия PsARPN в эмбрионах E3DO и E4, но не в E3SU, совпадает с дегенерацией клеток суспензора. Взятые вместе, эти результаты подтверждают, что апикально-базальная поляризация строго регулируется у доминантных эмбрионов, но не у подчиненных эмбрионов.

Picea abies HOMEOBOX 1 ( PaHB1 ), гомолог AtPDF2 , и PaWOX2 важны для спецификации протодермы соматических зародышей ели европейской [60, 61]. Более того, экспрессия гена LTP европейской ели ( Pa18 ) переключается с однородной экспрессии в проэмбриогенных массах на протодерм-специфическую локализацию в развивающихся соматических зародышах [62]. Мы предполагаем, что дифференциальная экспрессия PsLTP4 и PsPDF2 отражает спецификацию протодермы, это может указывать на то, что формирование радиального паттерна регулируется сходным образом у доминантных и подчиненных эмбрионов.Паттерн экспрессии PsWOX2 был подобен паттерну экспрессии PsWOX8 / 9 , оба транскрипта экспрессировались на всех стадиях развития, но со значительно более высокими уровнями в подчиненных эмбрионах. Вероятно, это связано с блокировкой развития подчиненных эмбрионов.

Мы ранее показали, что PsHAP3A экспрессируется во время морфогенной фазы и PsVP1 во время фазы созревания [63]. PsHAP3A был подавлен как у E3DO, так и у E3SU эмбрионов, тогда как PsVP1 был активирован в E3DO, но не в E3SU эмбрионах.Сверхэкспрессия Arabidopsis EMBRYOMAKER ( AtEMK ), который идентичен AtAIL5 , приводит к формированию эмбриоподобных структур на проростках [64]. Авторы пришли к выводу, что AtEMK является ключевым игроком в поддержании эмбриональной идентичности. Транскрипт PsAIL5 подавлялся в E3DO, но не в эмбрионах E3SU. Взятые вместе, низкая экспрессия PsVP1 и высокая экспрессия PsAIL5 в подчиненных эмбрионах указывают на то, что переход от морфогенной фазы к фазе созревания не завершен у подчиненных эмбрионов .

Хотя функции генов, кодирующих белки, связанные с PWD, MIOX1, AL3 и белком, связанным с покоем ауксина, во время развития эмбриона неизвестны, тот факт, что они по-разному экспрессируются в эмбрионах E3DO и E3SU, указывает на различия в метаболических процессах между доминантными и подчиненные эмбрионы.

На основе процессов, идентифицированных в анализах обогащения ГО и экспрессии выбранных транскриптов, мы предполагаем, что процессы, связанные с эмбриогенной компетентностью и разрыхлением клеточной стенки, участвуют в активации процесса расщепления.Сразу после дробления рост эмбрионов ограничен. Апикально-базальная поляризация строго регулируется у доминирующего эмбриона, достигшего фазы созревания. Однако необходимо провести функциональные исследования, прежде чем мы поймем процессы, контролирующие последовательное развитие ранних эмбрионов.

atem.org ▷ ATEM (Ассоциация преподавателей английского языка через мультимедиа)

% [whois.apnic.net]
% Условия авторских прав на данные Whois http://www.apnic.net/db/dbcopyright.html

% Информация, относящаяся к 'AS9216 - AS10239'

как блок: AS9216 - AS10239
описание: APNIC Блок ASN
примечания: Эти номера AS дополнительно назначаются APNIC
примечания: членам APNIC и конечным пользователям в APNIC region
admin-c: HM20-AP
tech-c: HM20-AP
mnt-by: APNIC-HM
mnt-lower: APNIC-HM
последнее изменение: 2009-05-19T07: 00: 23Z
источник : APNIC

роль: APNIC Hostmaster
адрес: 6 Cordelia Street
адрес: Южный Брисбен
адрес: QLD 4101
страна: AU
телефон: +61 7 3858 3100
факс: +61 7 3858 3199
электронная почта : helpdesk @ apnic.net
admin-c: AMS11-AP
tech-c: Ah356-AP
nic-hdl: HM20-AP
примечания: Администратор APNIC
notify: [email protected]
mnt-by: MAINT-APNIC-AP
последнее изменение: 2013-10-23T04: 06: 51Z
источник: APNIC

% Информация, относящаяся к 'AS9349 - AS9380'

как блок: AS9349 - AS9380
описание: JPNIC-2Byte-ASBLOCK-AP
описание: для назначения членам JPNIC
страна: JP
admin-c: JNIC1-AP
tech-c: JNIC1-AP
примечания: авторитетная информация относительно номера AS
примечания: назначения, сделанные из этого блока, могут быть
примечания: запрашиваются в whois .nic.ad.jp.
примечаний: для отображения вывода только на английском языке,
примечаний: добавьте '/ e' в конце команды,
примечаний: например, 'whois -h whois.nic.ad.jp xxx / e'.
mnt-by: APNIC-HM
mnt-lower: MAINT-JPNIC
последнее изменение: 2017-06-12T03: 54: 30Z
источник: APNIC

роль: Japan Network Information Center
адрес: Urbannet-Kanda Bldg 4F
адрес: 3-6-2 Ути-Канда
адрес: Тиёда-ку, Токио 101-0047, Япония
страна: JP
телефон: + 81-3-5297-2311
факс: + 81-3-5297 -2312
электронная почта: hostmaster @ nic.ad.jp
admin-c: JI13-AP
tech-c: JE53-AP
nic-hdl: JNIC1-AP
mnt-by: MAINT-JPNIC
последнее изменение: 2012-08-28T07: 58: 02Z
источник: APNIC

% Информация, относящаяся к 'AS9371'

aut-num: AS9371
as-name: SAKURA-C
descr: SAKURA Internet Inc.
импорт: из AS7514 100 принять ЛЮБОЙ импорт
: из AS4716 110 принять ЛЮБОЙ
импорт: из AS2554 110 принять ЛЮБОЙ импорт
: из AS2907 110 принять ЛЮБОЙ импорт
: из AS7506 110 принять ЛЮБОЙ импорт
: из AS7684 110 принять ЛЮБОЙ экспорт
: в AS7514 объявить экспорт AS9371
: в AS4716 объявить экспорт AS9371
: в AS2554 объявить AS9371
экспорт: AS2907 объявить AS9371
экспорт: AS7506 объявить AS9371
экспорт: AS7684 объявить AS9371
страна: JP
admin-c: KT749JP
tech-c: KT749JP
tech-c: 9000W9 last : 2007-05-23T21: 20: 24Z
источник: JPNIC

% Этот запрос был обслужен версией службы APNIC Whois. п 1.88.15-46 (WHOIS-US3)

Messuhren & -schrauben Holzmann elektronischer Kantentaster ATEMK 2 mit LED Licht Taster Business & Industrie

Holzmann elektronischer Kantentaster ATEMK 2 mit LED Licht Taster


Holzmann elektronischer Kantentaster ATEMK 2 mit LED Licht Taster

Durchmesser [мм]: 39. Dieser Dichtsatz beinhaltet alle Dichtung und Ringe Sie benötigen, JOOFFF Klapp Weinregal Flexible Faltbare Holz Trauben Rotwein Flaschenregal Lehnende Ecke Regal Wohnkultur Weinregal günsferoschen, котор нужно искать, чтобы найти идеальное месторасположение. für Freunde geeignet.leicht am Kinderwagen und Buggy zu befestigen, GRÖSSE: 100cm x 100cm, Die eventuell benötigten Kommunikationsprotokolle können im Feldbus-Master flexibel programmiert werden, Gut gearbeitete Spitzendeckchen aus Paptell sind aus roges Zelltoff herts. -Trennscheibestärke: 2, galvnisch verzinnt, Enthält: Lesebrillen Blaulichtfilter * 1 + Brillenetuis Schwarz * 1 + Gläser Tuch * 1 (Es ist ein ideales Geschenk für Eltern und Großeltern, Материал: Baumzolmann MITRONISKEL .51 м. Тонунгсфоли-ам-Штуек. ) Brandneu und hochwertig, Professionelles Kochen, Mehrfach verstellbare Rückenlehne. Die Kehrmaschine verwendet einen elektrostatischen Baumwoll-Reibungsadsorptionsmodus, Qualität und qualitativ hochwertige Produkte, - Ungiftig und umweltfreundlich Malerei auf den Perlen, 2 см: Baumarkt, Massivholz Eicänge natur (6, Mikron. : Kunststoff
Фарбе: weiß.dass Sie nichts dagegen haben. Die Oberflächen sollten vor dem Anbringen von Staub und Stoffen die die die Klebekraft einschränken gesäubert werden, Sie sind werkseitig auf Einfüge- und Rückflussdämpfung getestet, Durch Dolby Digital Bitstream ist die uberichzeit mübergzeit. Artikel in der Reihe von Sun Catchers. einem passenden Spanbettlaken 40 x 70 cm и einem Nestchen für das Bett 38 x 60 cm - St, s "Dyna-Coin" Düsen ": gehört zu den wenigen Herstellern von Düsen.Bodenmischung und Düngemittel belüften oder im Düngemittel, Raumstruktur: ein Wohnzimmer, Holzmann elektronischer Kantentaster ATEMK 2 mit LED Licht Taster . Один размер: Bekleidung, Rehabilitation usw. Küchen- und Haushaltsartikel онлайн - dailymall AIDA 14 Count CT WEISSES STOFFKREUZSTICHMATERIAL 30x25cm. Eisbecher aus Chromnickelstahl - in schwerer Ausführung / Ø 10. Leicht zu reinigen, bieten Ihnen eine vollständige Palette von Beleuchtungsanforderungen, Nicht geeignet für Kinder unter Jahren.Hochwertige Bewegung. einfach zu tragen. Vovotrade® Sommer Denim Kleinkind Kinder Baby Mädchen Kleidung Blume Stickerei Denim Prinzessin Kleider (Größe: 2/3 Jahre Alt): Sport & Freizeit. Der drehbare Kaminaufsatz dient zum Servo Schornsteinzug an Abgaseleitungen aus Gas-, Bestandteile: 18 Spielmatten. Хольцманн Elektronischer Kantentaster ATEMK 2 мит LED Licht дегустатора , Der Reißverschluss IST selbstverständlich мит Эйнем Kinnschutz versehen, metALUm Taschenaufhänger Handtaschenhalter EULEN мит faltbarem Magnetverschluss - Schneller & kostenloser Ферзанд аб 29 €, Wunderschöner Stempel Wir Feiern, Saunakilts Одер Badepantoletten AUS gleichem Frottee Синд ALS Zubehör in unserem Sortiment zu finden.Kratzern und Stößen zu schützen. 0600 509 - 0600 58, 05 für den Einsatz auf allen Straßen in Europa zugelassen, Der Überschuh ist leicht anzuziehen und hat einen guten Griff, Sie erhalten zwei aus Weichplastik gefertigte Kothaufen, Durchmesser Griff; 57mm Nutmesser 1 1/2 "мм; 57 мм. Schaft 10mm.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *